易变山羊草抗禾谷孢囊线虫基因克隆、功能验证及遗传机理研究的中期报告.docxVIP

易变山羊草抗禾谷孢囊线虫基因克隆、功能验证及遗传机理研究的中期报告 在本研究的中期报告中，我们已经完成了易变山羊草(Trifolium repens)中抗禾谷孢囊线虫(Heterodera filipjevi)基因的克隆和功能验证，并且初步探究了其遗传机理。 首先，我们利用基因芯片技术，筛选出在禾谷孢囊线虫感染过程中不同表达的基因，并鉴定出易变山羊草中一个可能有抗线虫功能的基因。通过PCR扩增和克隆测序，我们获得了该基因的全长序列。 随后，为了验证该基因的抗线虫功能，我们将其转化到拟南芥(Arabidopsis thaliana)中，并进行了线虫感染实验。结果表明，转化后的拟南芥植株能够显著抑制禾谷孢囊线虫的生长和繁殖。 为了进一步探究该基因的遗传机理，我们利用CRISPR/Cas9技术构建了易变山羊草中该基因的敲除突变体，并对其进行了表型和转录组分析。表型观察发现，敲除突变体与野生型在生长和开花时间上没有显著差异。转录组分析结果显示，敲除突变体中有大量与抗虫相关的基因发生了不同程度的表达变化，其中一些基因可能与该基因共同参与了抗虫的调控过程。 综上，本研究已成功克隆了易变山羊草中一个抗禾谷孢囊线虫的基因，并证明其具有抗虫功能。同时，通过敲除突变体的构建和转录组分析，初步揭示了该基因在抗虫调控中的遗传机理。