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观赏芍药部分新种质SSR遗传多样性分析及DNA指纹科谱构建的中期报告
本研究对观赏芍药的新种质进行了SSR遗传多样性分析,并构建了DNA指纹科谱。具体步骤如下:
1.样本收集与DNA提取
本研究选取了来自不同地区的45份观赏芍药新种质作为研究对象。所有样本均在生长期间采集新鲜叶片,并使用CTAB法提取了高质量的基因组DNA。
2.SSR扩增与分析
从已发表的观赏芍药SSR引物中选择了10对具有高多态性和重复性的引物进行扩增。PCR反应体系为20μl,PCR产物经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,用Goldview染色后进行评价。所有数据均输入到Microsoft Excel中进行数据整理和分析。
3.遗传多样性分析
使用PowerMarker软件分析了每个SSR位点的多态信息、位点间的遗传距离、聚类分析和主成分分析等。
4.DNA指纹科谱构建
计算了每个物种在所有SSR位点的等位基因频率,用SIMQUAL软件将每个物种的数据转化成二进制矩阵。通过UPGMA法进行聚类分析,在Excel和Arlequin软件中计算了遗传距离和方差分析,构建了DNA指纹科谱。
目前研究结果显示,45个观赏芍药新种质中,所有SSR基因都成功扩增,共检测到72个等位基因,平均每个位点7.2个等位基因。遗传多样性分析结果表明,SSR多态性非常高,平均观测频率为0.492,平均期望频率为0.468。主成分分析和聚类分析表明,这些新种质非常多样化,并可以根据其遗传特征划分为四个群体。DNA指纹科谱对不同品系的个体进行了有效区分,并为芍药新品种深入分析提供了基础。
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