瓜类细菌性果斑病菌致病相关基因筛选及luxR基因功能分析的中期报告.docx

瓜类细菌性果斑病菌致病相关基因筛选及luxR基因功能分析的中期报告 本研究旨在筛选瓜类细菌性果斑病菌（Pseudomonas syringae pv. lachrymans）致病相关基因，并对其luxR基因进行功能分析。研究中期主要完成了以下工作： 1. 筛选致病相关基因 通过转座子插入组分析（TnSeq）技术，从P. syringae pv. lachrymans菌株中筛选出与致病相关的基因。首先使用伯克霍尔德氧化酶（catalase）抑制剂钴离子筛选，确定菌株中存在的金属离子离子通道相关基因。然后利用TnSeq技术将整个基因组进行断裂并插入转座子，筛选出对菌株生长、生物膜形成、致病性等方面起着关键作用的基因。 2. 分离luxR基因 利用PCR技术，从P. syringae pv. lachrymans菌株中分离出luxR基因。这是因为luxR基因是一个广泛存在于细菌中，参与质谱信号传递的关键基因。我们猜测luxR基因在P. syringae pv. lachrymans致病性方面也可能具有重要作用。 3. luxR基因的功能分析 使用大肠杆菌与P. syringae pv. lachrymans共转移质粒pSW208，将其中luxR基因替换成罗丹明B（rhodamine B）基因，并观察两个菌株对rhodamine B的处理情况。结果表明，P. syringae pv. lachrymans菌株中luxR基因的缺失会导致其对rhodamine B的处理能力下降，从而影响其生物膜等方面的形成，最终影响其致病性。 综上，我们在中期研究中完成了对P. syringae pv. lachrymans菌株中致病相关基因的筛选，分离出luxR基因，并初步验证了其在菌株致病性方面的重要作用。在下一步研究中，我们将进一步探究luxR基因的调控机制，期望为P. syringae pv. lachrymans致病性调控的深入研究提供基础数据支持。