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卵巢癌相关抗原CA125的原核表达、纯化及其抗体的制备的中期报告
本次研究旨在进行卵巢癌相关抗原CA125的原核表达、纯化以及抗体的制备。在前期的实验中,已经成功构建了pTXB1-CA125质粒,并通过多种方法进行了优化和筛选,最终找到了最适合此质粒表达的条件和细菌株。接下来,我们开始了大规模的原核表达和纯化工作。
首先,我们在大量培养基中扩增含有pTXB1-CA125质粒的大肠杆菌菌落,并在IPTG诱导的条件下进行表达。表达后的细胞经过离心分离,利用柱层析技术分离和纯化目标融合蛋白TXB-CA125。经过多次纯化和检测,我们获得了高纯度的目标融合蛋白TXB-CA125。
现在,我们正在进行抗TXB和抗CA125的免疫组化实验,以验证我们获得的目标蛋白是否是CA125。同时,我们也开始了抗原血清的采集和免疫抗体的制备。我们选择了纯化的TXB-CA125作为免疫原进行小鼠免疫,并通过ELISA检测免疫抗体的水平。目前免疫抗体的水平已经逐渐上升,接下来我们将进行抗体的纯化和鉴定。
总的来说,本研究已经成功地进行了CA125的原核表达、纯化以及抗体的制备的初步过程,并已经取得了一些进展。接下来,我们将继续深入探索CA125的生物学功能,并利用制备的抗体进行相关实验研究。
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