表观遗传调控对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和基因表达的影响的中期报告.docxVIP

表观遗传调控对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和基因表达的影响的中期报告 背景： 表观遗传调控是指通过非DNA序列相关的方式，调控基因的表达。它包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA的调控。在人胰腺癌中，表观遗传调控异常常见，并且与肿瘤的发生、发展和治疗反应密切相关。 目的： 本实验旨在探究表观遗传调控对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和相关基因表达的影响。 方法： PANC-1细胞培养：PANC-1细胞分别在常规培养基和特殊培养基中培养24小时，使其达到稳态生长。 实验组设计：将PANC-1细胞分为3组，即对照组、DNA甲基转移酶抑制剂组（5-aza-CdR组）和组蛋白去乙酰化酶抑制剂组（TSA组）。分别在对应培养条件下培养PANC-1细胞24小时。 MTT法检测细胞增殖：将各组PANC-1细胞均匀地种在96孔板中，每组各设置6个孔，孔内添加相应处理剂，培养24小时。再加入MTT检测液，培养4小时。最后吸取上清，加入DMSO溶解。测定各孔OD值，计算细胞存活率。 实时荧光定量PCR：分别提取各组PANC-1细胞RNA，用反转录酶把RNA转化为cDNA。利用实时荧光定量PCR技术检测各组PANC-1细胞中有关基因的表达情况。 结果： 1. MTT实验：与对照组相比，5-aza-CdR组和TSA组的PANC-1细胞存活率显著下降（P0.05）。 2. 实时荧光定量PCR：与对照组相比，5-aza-CdR组中DNA甲基转移酶1（DNMT1）和触发器相关因子2（TCF2）的表达显著下调；TSA组中组蛋白脱乙酰化酶1（HDAC1）和HDAC2表达显著上调（P0.05）。 结论： 表观遗传调控在人胰腺癌中具有重要的调节作用。通过调节DNA甲基化和组蛋白修饰，可以影响PANC-1细胞的增殖和相关基因的表达。因此，表观遗传调控在胰腺癌的治疗和预防中具有重要的潜在应用价值。