尿液样品代谢产物提取.docxVIP

新一代靶向代谢组学测试尿样代谢产物提取方法 李克峰博士 实验背景和目的 代谢(Metabolism)是维持生物体功能进行的各类生化反应的总称。代谢产物 (Metabolites)是参与生物体内代谢的小分子化合物，其分子量一般在1200 Da以下。 代谢产物具有非常重要的功能，是基因、蛋白与环境作用的直接反应。新一代靶向 代谢组学技术(Next-generation Targeted Metabolomics)是近几年随着检测仪器的更 新，刚刚发展起来的代谢组学新技术，旨在测定生物体内所有小分子的代谢产物的 绝对浓度，了解其在疾病(Diseases)、胁迫(Stresses)等条件下的变化，进而揭示表 观现象后的分子机制。 尿液(Urine)是生物体代谢后，经过肾脏过滤，排除体外的“废物”。尿液中含 有丰富的代谢产物，对于研究生物体代谢意义重大。尿液是临床上评估疾病，特别 是肾脏相关疾病的主要手段之一。另外，尿里的一些代谢产物，也是癌症等重大疾 病的标志物。尿液取样非常方便，对生物体没有损害，是代谢组学最常用的样品之 一。 实验需要准备的材料和器材 ?提取液(甲醇-乙腊(50:50, V/V)和13C稳定同位素内标物，提前放置-20 °C冰箱 预冷)； ?碎冰或者冰盒 ?涡旋仪 ?低温高速离心机(提前置于4 °C预冷) SpeedVac/lyophilize或者氮吹干，或者在通风厨挥