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第 21 章 衣原体
衣原体(Chlamydia)是一类严格在真核细胞内寄生,有独特的发育周期,能通过0.45 m滤菌器的细菌。
衣原体的共同特性有:①革兰阴性,圆形或椭圆形体,大小为 0.2~0.5μm;②
具有由细胞壁,与革兰阴性菌相似;③以二分裂方式繁殖,并有独特的发育周期;
④同时含有DNA和RNA两种核酸;⑤有核糖体和一定数目的酶,在宿主细胞提供能量的情况下能进行多种代谢;⑥对多种抗生素敏感。
衣原体广泛寄生于人类、哺乳动物及禽类体内,仅少数能致病。目前衣原体科下分两个属,12个种。对人致病的主要是衣原体属(Chlamydiae)6个种中的4个:沙眼衣原体(C. trachomatis)、肺炎衣原体(C. pneumoniae)、鹦鹉热衣原体(C. psittaci)和兽类衣原体(C. pecorum),主要引起眼、泌尿道和呼吸道感染。现将四种致病性衣原体比较如下(表21-1):
表21-1 四种衣原体的主要特性
性状
沙眼衣原体
肺炎衣原体
鹦鹉热衣原体
兽类衣原体
自然宿主
人、小鼠
人
鸟类、低等哺乳类
牛、羊
主要人类疾病
沙眼
肺炎
肺炎
呼吸道感染
性传播疾病
呼吸道感染
呼吸道感染
幼儿肺炎
原体形态
圆、椭圆
梨形
圆、椭圆
圆
包涵体糖原
+
-
-
-
血清型
18
1 (TWAR 株)
不明
3
DNA 同源性
与相同衣原体种与不同衣原体种
对磺胺的敏感性
90%
10%
敏感
90%
10%
不敏感
14%~95%
10%
不敏感
88%~100%
不敏感
注:TWAR: Taiwan, acute respiratory
(一)发育周期与形态染色
第一节 概述
一、生物学性状
衣原体在宿主细胞内繁殖,具有独特的发育周期,呈现两种不同的形态结构, 也即代表发育的两个时期(图21-1)。
图21-1 衣原体的发育周期
1. EB吸附 2. EB被吞入 3. 8h后发育成RB 4. 24h,RB增殖
5. 30h,RB分化成EB,包涵体形成 6. 48h,细胞破裂,释放EB
原体(elementary body, EB):小球形、椭圆形或梨形,直径0.2~0.4?m。电
镜下可见到致密的类核结构和少量的核糖体,有胞壁,是发育成熟的衣原体,一般所讲的衣原体指的是原体。姬姆萨染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色。原体在宿主细胞外较稳定,无繁殖能力,但具有高度的感染性(图21-2)。当进入易感细胞后,在细胞膜包绕形成的空泡即吞噬体中逐渐发育,体积增大进入增殖状态,形成始体。
图21-2 原体(箭头所指)(荧光染色)(Murray et a,l1998)
始体(initial body):大球形,直径0.5~1?m。无致密核质,但有纤细网状结构,故又称网状体(reticulate body, RB)。始体无胞壁,姬姆萨和Macchiavello染色均呈蓝色。始体在细胞外很快死亡,故不具感染性。始体经二分裂方式繁殖出众多子代,形成致密的包涵体。始体在包涵体内逐渐成熟为子代原体,然后从破坏的感染细胞中释出;再感染新的易感细胞,开始新的发育周期。每个发育周期约为48~ 72小时,即:
原体→吸附→吞噬体 (空泡)→在吞噬体内形成始体→二分裂繁殖→形成包涵体
→在包涵体内成熟为原体→释放
原体和始体的主要性状比较见表21-2。
表21-2 原体和始体的性状比较
性 状 原体 始体
大小(直径,μm)
0.2~0.4
0.5~1
细胞壁
+
-
胞外稳定性
+
-
感染性
+
-
繁殖能力
-
+
毒性
+
-
(二)基因组特征
衣原体基因组大小在 1.04Mb~1.23Mb 之间。其中沙眼衣原体 D 血清型基因组1.04Mb, G+C 占 41.3%, 另有 1 个 7 493bp 的质粒。整个基因组有 894 个编码蛋白的基因,存在特别强的 DNA 修复和重组系统,未发现前噬菌体基因。
(三)培养特性
衣原体营专性细胞内寄生。绝大多数能在6~8天龄鸡胚或鸭胚卵黄囊中生长繁 殖,并可在卵黄囊膜内找到包涵体、原体和网状体颗粒。某些衣原体经一定接种途径可使小鼠感染,如鹦鹉热衣原体接种小鼠腹腔;性病淋巴肉芽肿衣原体接种小鼠脑内。
衣原体可在某些原代或传代细胞株中生长,如HeLa-299、BHK-21、McCoy或HL 细胞株,比鸡胚培养更敏感。为提高分离培养阳性率,可通过离心或用 X线照射细胞,使更多的衣原体吸附到易感细胞表面。
(四)抗原结构
根据细胞壁的不同成份,可分为属、种、型特异抗原。
属特异抗原 是衣原体属四种的共同抗原。位于胞壁,为脂多糖,类似革兰阴性菌的脂蛋白-脂多糖复合物。用补体结合试验检测。
种特异抗原 大多数衣原体的种特异抗原位于主要外膜蛋白( major out
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