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转CD14基因shRNA小鼠模型的制备的中期报告 制备CD14基因shRNA小鼠模型的实验已经进行至中期，现进行中期报告。 1. 实验目的： 本实验旨在制备CD14基因shRNA小鼠模型，通过降低小鼠体内CD14基因的表达，观察其对小鼠免疫系统的影响，为深入研究CD14基因的功能提供基础数据和理论依据。 2. 实验进展： （1）矢量构建：针对CD14基因设计了两个shRNA靶点，利用PCR技术分别扩增了两个shRNA序列，并克隆到pLVX-shRNA2-GFP慢病毒质粒中。验证PCR产物后，将重组质粒测序确保其正确性。 （2）病毒包装：将重组质粒转染至293T细胞中，并利用慢病毒包装系统产生了慢病毒载体液。通过检测GFP的表达情况，判断病毒感染效率并选择感染效率较高的慢病毒。 （3）小鼠感染：将筛选出来的病毒加入至小鼠肌肉中，进行感染。通过PCR和Western blot检测小鼠体内CD14基因的表达情况，筛选出CD14基因表达水平降低较明显的小鼠。 （4）进一步鉴定：拟进行流式细胞术和免疫组化等检测方法，进一步验证制备的CD14基因shRNA小鼠模型的降低CD14基因表达水平的稳定性和生物学特性。 3. 下一步工作： （1）加强病毒包装效率的优化和筛选； （2）进一步验证降低CD14基因表达水平的小鼠模型的可靠性和生物学特性； （3）利用该小鼠模型开展具有重要意义的免疫学研究。