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第六章;炸胚妒环替捻葡橡彪涡遍说瞻隆氨被岂敬未锁烁瓤联港晚畔泳伟烤烃谆褂酶工程制药酶工程制药; 酶工程是酶学和工程学相互渗透结合发展而形成的一门新的技术学科。它是从应用的目的出发研究酶、应用酶的特异性催化功能，并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。;二、酶的来源;2.动物酶来源的酶 猪胰蛋白酶和胃脂肪酶等。;3.微生物来源的酶 ② 微生物种类繁多，酶的品种全 在不同环境下生存的微生物有不同的代谢途径，可以产生适应不同环境的酶分子，如高温酶、中温酶和低温酶，耐高盐酶，耐酸、碱酶等。 ③ 微生物培养方法简单 微生物培养所用的原料大多为农副产品，来源丰富，机械化程度高，易于大批量生产。连续发酵生产可以提供经济有效的酶制剂产品。; 3.微生物来源的酶 ④ 利用微生物可以生产一些极端酶 由于酶在应用过程中常出现不稳定现象，尤其在高温、强酸、强碱和高渗等极端条件下更易失活，因此限制了酶在工业上的应用。利用嗜极菌生产的极端酶可克服这一缺陷。第一个极端酶——嗜热DNA聚合酶已成功地应用于PCR技术 。 ;三、酶在医药领域的应用;1.在疾病诊断方面的应用;血清酶; 酶具有专一性强、催化效率高等特点，可以利用酶来测定体液中某些物质的含量，从而诊断某些疾病。 例如：利用尿酸酶测定血液中尿酸的含量，从而诊断痛风病。固定化尿酸酶巳在临床诊断中使用。;2.在疾病治疗方面的应用; 蛋白酶可作为消炎剂，治疗各种炎症有很好的疗效。蛋白酶之所以有消炎作用，是由于它能分解一些蛋白质和多肽，使炎症部位的坏死组织溶解，增加组织的通透性，抑制浮肿，促进病灶附近组织积液的排出并抑制肉芽的形成。给药方式可以口服、局部外敷或肌肉注射等。 ; 蛋白酶经静脉注射，可治疗高血压。这是由于蛋白酶催化运动迟缓素原及胰血管舒张素原水解部分肽段而生成运动迟缓素和胰血管舒张素，使血压下降。 蛋白酶注射入人体后，可能引起抗原反应。通过酶分子修饰技术，可使抗原性降低或消除。另外，蛋白酶在使用时还可能产生某些局部过敏反应，要引起注意。 目前临床上使用的蛋白酶大部分来自动物和植物，如胃蛋白酶和菠萝蛋白酶等．;（2）溶菌酶 溶菌酶也是一种应用广泛的药用酶，具有抗菌、消炎、镇痛等作用。 溶菌酶作用于细菌的细胞壁，可使病原菌，腐败性细菌等溶解死灭，对抗生素有耐药性的细菌同样起溶菌作用，具有显著疗效而对人体的副作用很小，是一种较为理想的药用酶。溶菌酶与抗生素联合使用，可显著提高抗生素的疗效。 ;（3）用酶制造各种药物;（4）酶在分析检测方面的应用;单酶反应检测;脲酶 脲酶能专一地催化尿素水解生成氨和CO2。 通过气体检测或者使用氨电极、 CO2电极、NH4+电极等，测出氨或CO2的量，就可确定尿素的量。 葡萄糖氧化酶 该酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和H2O2。 通过测定酸的生成或氧的减少来确定葡萄糖的量，也可用pH电极、氧电极等测出葡萄糖的量。该酶巳广泛用于食品，发酵工业和临床诊断等方面。;多酶偶联反应检测;葡萄糖氧化酶与过氧化物酶偶联; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和H2O2，生成的H2O2在过氧化物酶的作用下分解为水和原子氧，新生态的原子氧将无色的还原型邻联苯甲胺氧化成蓝色物质。颜色的深浅与样品中葡萄糖浓度成正比。随着样品中葡萄糖浓度的增加，酶试纸的颜色由粉红一紫红一紫色一蓝色，不断加深。其反应过程如下：;酶标记免疫反应检测;碱性磷酸酶 将碱性磷酸酶与抗体(或抗原)结合，制成碱性磷酸酶标记抗体(或碱性磷酸酶标记抗原)。该酶标记抗体(或酶标抗原)与样品液中的对应抗原(或抗体)，通过免疫反应结合成碱性磷酸酶—抗体—抗原复合物。 将该复合物与硝基酚磷酸(NPP)反应。碱性磷酸酶催化NPP水解生成硝基酚和磷酸。硝基酚呈黄色，黄色的深浅与碱性磷酸酶的含量呈正比。故此，通过分光光度计测定420nm波长下的光吸收率，就可测出复合物中碱性磷酸酶的量，从而计算出欲测抗原(或抗体)的含量。; 酶标免疫测定技术还可以应用于某些具有亲和力的生物分子对之间的测定。如用酶标抗胰岛素蛋白测定胰岛素的含量，酶标抗生物素蛋白测定生物素含量等。这类检测的原理与酶标免疫测定相类似，但由于不是抗体抗原间的免疫结合，只是分子对之间的亲和结合，故称为酶标亲和检测。;第二节 酶和细胞的固定化; ⒉固定化酶的特点