黄连木LEAFY同源基因cDNA全长的克隆与载体构建的中期报告.docx

黄连木LEAFY同源基因cDNA全长的克隆与载体构建的中期报告 黄连木LEAFY同源基因cDNA全长的克隆与载体构建的中期报告如下： 1.实验目的： 通过PCR技术克隆黄连木LEAFY同源基因的cDNA全长，构建对应的载体，并进行序列鉴定。 2.实验步骤： （1）设计引物：根据已知的黄连木LEAFY同源基因序列，利用软件设计一对覆盖全长cDNA的引物。 （2）PCR扩增：以黄连木总RNA为模板，使用所设计的引物对其进行PCR扩增。 （3）制备PCR产物：将PCR产物通过凝胶电泳进行分离、回收，然后进行纯化。 （4）克隆：将纯化后的PCR产物与选用的载体进行连接，并通过转化等方法将目的DNA片段转化至大肠杆菌中，筛选出含有目的片段的正向克隆。 （5）鉴定：通过PCR、酶切、测序等方法，对所得克隆进行鉴定。 3.实验结果： 根据所设计的引物，我们成功地扩增出了黄连木LEAFY同源基因的cDNA全长，PCR产物大小符合预期。通过测序鉴定，确认该PCR产物序列与已知黄连木基因序列高度一致。此外，我们成功地将目的DNA片段克隆至载体中，并通过PCR、酶切等方法筛选出了正向克隆。 4.结论： 我们成功地克隆了黄连木LEAFY同源基因的cDNA全长，并构建了对应的载体。通过鉴定，确认所得PCR产物序列正确，克隆正向成功。接下来，我们将继续进行进一步研究。