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不同方法制备cqds的比较研究 1 cqds的合成和应用 近年来，由于其优秀的光学和物理性质，引起了人们的广泛关注和研究。其中，有三个系列的扬子点：c-t族（zns）、-t族（gaas，inp）和-t族（pbs，pbse）是研究领域中的主要元件。然而，引入重金属元素具有很大的毒性，限制了它们在活动场所的应用。因此，寻找理想的分解材料，并具有类似于半纳米光学性质的材料已成为研究的重点。根据交叉学科的研究, 在同样的尺寸下碳量子点 (CQDs) 毒性最低, 且具有发光稳定、易于表面功能化等优点[12,13,14,15,16,17,18]。Sun课题组报道了CQDs在细胞成像方面的应用, 自此许多研究者致力于研究其在生物成像方面的应用, 取得了一定的进展:Gao等用聚乙烯亚胺PPEI-EI钝化后的CQDs对人体乳腺癌细胞MCF-7进行标记, 通过双光子荧光显微镜成像表明其在细胞膜和细胞质内都能成像;Liu等以CQDs-PEI-B/pDNA复合物标记和转染COS-7细胞, 在不同激发波长下其分别呈现不同颜色的荧光。 Sun等通过激光轰击水蒸气和氩气中的石墨靶获得各种尺寸的团聚碳颗粒, 粗产物经硝酸回流后与有机聚合物表面钝化, 最终获得具有较强可见光的CQDs;Liu等报道的酸煮蜡烛灰制备方法直接得到发光CQDs (2nm) 不需要钝化, 且可发出多色可见光, 但其荧光量子产率仅约为1%;Zhou和Zhao两个课题组分别以碳纳米管和石墨为原料, 用电化学方法也获得了荧光CQDs, 且荧光量子产率有一定程度的提高, 但重金属电解液的存在限制了其进一步的使用;Baker对近年来CQDs合成研究进展进行了总结。牛血清白蛋白 (BSA) 是一种重要的载体蛋白, 在生物体内主要起到平衡渗透压和转运营养等作用, 是生物学中重要的模式蛋白, BSA中含有581个氨基酸残基, 其中的35个半胱氨酸组成了17个二硫键, 同时在肽链的第34位有一个自由巯基, 故其与许多小分子化合物之间通过分子作用力形成复合物。在人体生理pH条件下, CQDs与BSA相互作用的研究, 对于其作为荧光标记手段在生物体内的标记和检测有重要意义。 笔者以木炭为碳源, 考察回流法、微波法和超声法制备的CQDs, 得到制备CQDs的最佳制备方法, 合成CQDs并对其进行修饰, 最后将其应用于与BSA的相互作用并探讨相互作用机理, 为CQDs在生物标记中的应用提供初步的实验依据。 2 实验 2.1 仪器、检测方法 试剂:硝酸 (国药集团化学试剂有限公司) ;PEG2000 (西陇化工股份有限公司) 等均为分析纯, 实验用水为超纯水。 仪器:紫外分光光度计 (Shimadzu UV-2100) ;荧光分光光度计 (Shimadzu RF-5301) ;荧光倒置显微镜 (OLYMPUS-IX71-F22FL/PH) ;超声仪 (KH-250 DB, 昆山禾创超声仪器有限公司) ;数显恒温水浴锅 (HH-2型, 国华电器有限公司) ;pHS-3C (上海雷磁) ;离心机 (德国, Eppendorf 5418) 微波炉 (Galanz) ;移液抢 (DT63818, 北京大龙兴创实验仪器有限公司) 。 2.2 木材的制备 将木屑在马弗炉中623.15K绝氧灼烧而得 (碳质量分数约为99.8%) 。 2.3 实验结果及分析 分别采用不同的回流、微波及超声等方法, 以木炭为碳源, 经过强氧化性硝酸处理, 制备粒径均匀的CQDs, 具体步骤如下: 回流法制备CQDs:取木炭0.2g, 加入5 mol/L的硝酸溶液50 mL, 置于圆底烧瓶中, 393.15 K下磁力搅拌回流8h, 将回流后的反应液抽滤, 得到上清液, 用NaOH调节溶液pH值至中性, 离心, 去除溶液中未完全反应的黑色木炭颗粒, 得到褐色上清液, 待用。强氧化性酸处理木炭主要起到两个作用: (1) 有利于均匀分散碳纳米颗粒, (2) 在碳颗粒表面引入羧基、羟基等基团, 使颗粒表面具有亲水性, 有利于聚合物修饰及CQDs的进一步应用。 微波法制备CQDs:取用木炭颗粒约0.2g, 加入5 mol/L的硝酸溶液50 mL, 置于微波炉加热, 微波功率为50% (若以微波炉工作10 min为一个循环, 则开5 min, 关5 min) 。 超声法制备CQDs:取用木炭颗粒约0.2g, 加入5 mol/L的硝酸溶液50 mL, 置于超声仪中超声 (功率250 W, 频率50kHz) 。 2.4 修饰cqds溶液 在回流8h的CQDs溶液中分别加入20 mg、50mg、100 mg、150 mg和200 mg PEG2000对其进行表面修饰, 另取不加PEG2000的CQDs溶液作为对照, 一同置于微波炉加热30 min。 2.5 配制、