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急性眼刺激试验
1 目的
检测消毒剂对实验动物眼睛的急性刺激和腐蚀作用。
2 实验动物
使用3只家兔。试验前检查家兔双眼,有异常者不能用于试验。
3 操作程序
(1)受试物一般为黏膜消毒或空气消毒应用液的5 倍浓度的溶液或原液。吸取受试物0.1ml,滴入家兔一侧眼结膜囊内。另一侧眼以生理盐水作为正常对照。
(2)滴受试物后,将眼被动闭合4s,30s后用生理盐水冲洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d,肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。如果72h内未出现刺激反应,或第7d或第14d,眼睛刺激反应完全恢复,即可提前终止试验。必要时,用2% 荧光素钠溶液或裂隙灯、放大镜检查角膜及虹膜变化。
4 评价规定
按表2-13对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分,并分别计算每只动物在三个不同观察时间(24h、48h和72h)角膜损害、虹膜损害、结膜充血和结膜水肿四方面的“平均评分”(即每只动物的24h、48h和72h评分之和除以观察数3)。分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行,按表2-14、表2-15眼刺激反应分级标准判定受试物对眼睛的刺激强度。
表2-13 家兔急性眼刺激反应的评分标准
眼损害表现 评 分
角膜损害:
无溃疡形成或混浊 0
散在或弥漫性混浊,虹膜清晰可见 1
半透明区易分辨,虹膜模糊不清 2
出现灰白色半透明区,虹膜细节不清,瞳孔大小勉强可见 3
角膜不透明,混浊,虹膜无法辨认 4
虹膜损害:
正常 0
皱褶明显加深,充血,肿胀,角膜周围有中度充血,
瞳孔对光仍有反应 1
出血、肉眼可见破坏,或瞳孔对光无反应 2
结膜(睑结膜、球结膜)充血
血管正常 0
血管充血呈鲜红色 1
血管充血呈深红色,血管不易分辨 2
弥漫性充血呈紫红色 3
结膜(睑结膜、球结膜)水肿
无水肿 0
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