免疫学技术演示文稿.pptVIP

（三）分子生物学检测法 应用细胞因子cDNA探针或寡核苷酸探 针，经放射性核素（32P或35P）、生物素 或地高辛标记，与提取的细胞因子mRNA进行 杂交（Northern blot）；亦可在细胞或组织切 片上进行原位杂交分析；若同时结合免疫组化 技术，还可鉴定表达细胞因子基因的细胞类型。 本文档共128页；当前第94页；编辑于星期二\9点48分 分子生物学检测法优点：特异性高。 分子生物学检测法缺点：仅能检测CK基因表达情况，不能直接提供CK含量及生物活性等信息，故此法主要用于研究CK基因表达与调控。 本文档共128页；当前第95页；编辑于星期二\9点48分 四、黏附分子的检测 （一）细胞膜表面AM检测 1、间接免疫荧光法——组织细胞表面AM 组织切片标本+抗AM单抗+羊抗小鼠IgG荧光抗体，进行间接免疫荧光染色，借助荧光显微镜观察表达AM的阳性细胞数。 2、间接酶免疫组化法——组织细胞表面AM 组织切片标本+抗AM单抗+羊抗小鼠IgG酶标抗体，加入酶底物显色，显微镜观察表达AM的阳性细胞数。 3、流式细胞术——内皮、淋巴细胞等表面AM 待检细胞悬液+两种荧光素标记单抗，在流式细 胞仪上可同时检测胞膜表面两种不同的AM。 本文档共128页；当前第96页；编辑于星期二\9点48分 （二）可溶性AM测定 1、ELISA双抗体夹心：最常用于检测选择素家族和免疫球蛋