大鼠钙离子（Ca2+）ELISA试剂盒操作说明.docVIP

大鼠钙离子（Ca2+）ELISA试剂盒操作说明 大鼠钙离子（Ca2+）ELISA试剂盒操作说明 大鼠钙离子（Ca2+）ELISA试剂盒实验原理 大鼠钙离子（Ca2+）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠钙离子（Ca2+）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠钙离子（Ca2+）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 样本处理及要求 1. ?血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2. ?血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃?1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当