水环境卫生细菌学检测—实验物品准备及灭菌.pptx

玻璃器皿的准备 ;教学内容;教学目标;一、内容引入; 微生物实验需要洁净、无菌的玻璃器皿，不洁净、有菌的玻璃器皿会对微生物实验带来影响，甚至能造成实验的无法进行或错误结果。 　在微生物实验的开始，首先要进行玻璃器皿的洗涤与包扎，并进行灭菌处理，以保障实验的需要。 ;培养皿 移液管 锥形瓶 试剂瓶等;三、玻璃器皿的无害化处理及洗涤;注意点： 　　含菌培养液或熔化后培养基，需放入专门废物收集桶进行后续无害化处理，不能直接倒入洗涤池或垃圾桶，以免堵塞或污染。;四、玻璃器皿的包扎;2.吸管 将1张整版大小报纸对半裁开，取其半张； 将窄边的1角折起约30度，移液管吸端垂直抵住； 折起前卷，要求卷紧； 末端旋扭成丝状。;3.试管 需配备试管塞；一起包扎（一般7支，或根据需要）；用2层20cm左右大小的报纸（能将塞子部位完全盖住），盖套住试管塞，在塞子下方用橡皮筋或纱线扎紧。 4.锥形瓶 需配备瓶塞，作样品处理用时需内放少量玻璃珠，单个包扎，方法参照试管的包扎。;五、玻璃器皿的灭菌;2. 干热空气灭菌 适用材料：包扎好的培养皿、空试管、空锥形瓶、移液管等； 所用设备：电热鼓风干燥箱 灭菌要求：160℃2h;注意事项： 箱内物品不要放置太多、太靠边，底层不放置； 材料上不得贴标签； 灭菌完成后不要立即取出材料，需等温度下降到室温后，否则易导致玻璃仪器破裂。;六、任务考核;培养基的制备 ;教学内容;教学目标;一、内容引入; 微生物的分离、纯化、检验等过程中均需要用到培养基，不同的使用目的需要选用不同的培养基。 　在培养基的配制过程中，需要严格按照培养基的配制要求，准确做好配方各成分的称取、混合熔化、分装、灭菌、保存等环节，保证培养基的配制适当，达到选用要求。 ;根据使用目的，收集资料； 比对不同来源资料，确定培养基配制方法，并记录来源依据； 严格按照规定要求配制。;三、培养基的配制;2.培养基成分的混合与融化 工具：不锈钢锅或大烧杯，电炉或磁力搅拌加热板 直接混合：常温水能均匀溶解的药品 加热融化：琼脂、牛肉膏、蛋白胨等，需注意搅拌??防锅底焦化或漫出；注意补充蒸发掉的水量。;天然原料营养成分的制取： 胡萝卜等直接粉碎即可； 马铃薯、燕麦、黄豆、牛肉等需煮制，经过切碎、煮沸（不同时间要求）、过滤（薄绒布或4层纱布）等环节。;4.培养基的分装 锥形瓶：不超过2/3容量，加塞，牛皮纸包扎瓶口 试剂瓶：不超过2/3容量 试管：不超过2/3容量，制斜面用的一般装1/3容量，加塞，牛皮纸包扎管口（可数支一起包） 　 注意点：培养基不要沾染瓶口（可用玻棒引流）；瓶塞要塞紧。;四、培养基的灭菌;4.操作要求（环节） 　调节参数到要求指标； 　加足水； 　放置好材料，保证培养基液体状态时不沾附到瓶塞； 　盖紧盖； 　设置排气孔适当位置，注意要排尽空气，保证温度指标的一致性； 　灭菌完成需待压力归零后方可取出材料； 　斜面试管需立即摆放制作。;1.质量检查 外观检查：看是否有容器破损、色泽异常等，有则弃之。 灭菌效果检查：36℃12h，看是否有杂菌生长，有则弃之。 营养状况检查：接入适用微生物菌株，培养看其生长状况，生长不正常则弃之。 2.保存 放置冷暗处或冷藏，不宜时间过长； 清晰标签，标记品名、制作日期、 ;六、任务考核