拟南芥总蛋白提取.docxVIP

河北经贸大学毕业论文 拟南芥蛋白不同提取方法的SDS PAGE凝胶电泳分析 专业名称：生物技术 班 级： 2003 02 学生姓名： 指导教师： 完成时间：2007年6月 摘要 植物蛋白提取方法有很多种，不论使用哪一种方法，均必须在操作 中保存生物大分子结构的完整性，保存活性防止变性及降解现象的发 生。因蛋白空间结构主要依靠氢键、盐键和范德华力的存在，遇酸、遇 碱、高温、剧烈的机械作用及强烈的辐射等均可导致活性丧失，因此选 择的条件应为十分温和。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术作为分离鉴定生 物大分子的一种实验技术手段，已经成为分子生物学实验室中的重要技 术之一。 本试验采用三种不同的方法（两种蛋白溶解法，一种蛋白沉淀法） 分别提取拟南芥不同组织（拟南芥整个植株，拟南芥叶片，拟南芥愈伤 组织）的蛋白，然后用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行电泳分析，通 过分析凝胶电泳图谱比较分析不同提取液提取蛋白的效果优劣从而确 定较好的蛋白提取法，以及拟南芥植株不同组织含有的不同蛋白。 实验结果表明提取液2提取蛋白的效果最好，电泳条带最清楚，提 取液3即三氯乙酸丙酮次之，提取液1即PBS溶液最次；并且拟南芥总 蛋白跑的电泳谱带最多且最清晰，叶片蛋白谱带最少且较模糊，说明植 物各组织的蛋白含量与种类存在差异，这与其功能性质具有相关性，叶 片电泳谱带少说明叶片蛋白只含有总蛋白的一部分， 由于根部蛋白受