α-干扰素联合环孢霉素A对T24ADM细胞耐药逆转的研究的中期报告.docxVIP

α-干扰素联合环孢霉素A对T24ADM细胞耐药逆转的研究的中期报告 研究概述： 本研究旨在探究α-干扰素联合环孢霉素A对T24ADM细胞耐药逆转的作用及其机制。T24ADM细胞是一种已被证实具有多重耐药性的人膀胱癌细胞。通过研究其耐药逆转的方法和机制有助于寻找治疗膀胱癌的新策略和药物。 研究方法： 第一步，使用MTT法检测α-干扰素、环孢霉素A单药或联用对T24ADM细胞增殖的影响。第二步，通过流式细胞术检测药物对T24ADM细胞周期和凋亡的影响。第三步，检测药物对细胞耐药性相关基因和逆转相关基因的表达改变，包括MDR-1、MRP、Lrp、TopoⅡ等基因的mRNA和蛋白表达。第四步，采用RNAi技术对上述基因进行沉默，探究其对细胞耐药性和逆转的影响。最后，使用原代人膀胱癌细胞验证研究结果的可行性。 研究成果： 经过实验，发现单用α-干扰素和环孢霉素A对T24ADM细胞增殖的抑制率均较低，但联合应用则有明显的协同作用。联合应用还能显著提高T24ADM细胞周期停滞和凋亡率，同时下调细胞耐药性相关基因MDR-1和MRP的mRNA和蛋白表达，上调逆转相关基因Lrp和TopoⅡ的表达。使用RNAi技术对上述基因进行沉默后，发现MDR-1和MRP的沉默可导致T24ADM细胞耐药性降低，且联合应用α-干扰素和环孢霉素A后的逆转效率更高。最后，在原代人膀胱癌细胞上验证结果也得到了一定的支持。 结论： α-干扰素和环孢霉素A联合应用可将T24ADM细胞的多重耐药逆转，并且其作用机制可能与下调MDR-1和MRP的表达、上调Lrp和TopoⅡ的表达有关。这些结果为探究膀胱癌治疗新策略和药物提供了重要线索。