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- 2023-10-30 发布于湖南
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噬菌体抗体库技术
;1.噬菌体抗体库技术概述
2.噬菌体展示系统
3.噬菌体抗体技术的操作
;治疗性抗体的发展经历了异源抗体、人源化抗体和人源性抗体几个阶段。目前,人源性抗体是治疗性抗体发展的主要方向,而噬茵体抗体库技术的出现为人源性抗体的制备提供了良好的技术平台,并且逐渐成为目前获得人源性抗体的主要手段之一。;噬菌体抗体库技术:
聚合酶链反应(PCR)扩增抗体的全套可变区基因,通过噬菌体表面展示技术,把Fab段或单链抗体(ScFv)表达在噬菌体的表面,经过“吸附-洗脱-扩增”过程筛选并富集特异性抗体。;构建的噬菌体抗体库根据其来源可分为2大类,一类为免疫抗体库,另一类为非免疫抗体库。
免疫抗体库的抗体基因来源于抗原免疫的个体,因此不需要很大的库容量即可从该类抗体库中筛选到针对某一抗原的特异性抗体。但由于免疫本身的限制性和偏向性,利用免疫抗体库制备针对弱抗原自身抗原及具有毒性抗原的抗体均无效,而且某一特定的抗体库只能产生针对特定抗原的抗体,不能作为一个广泛应用的平台。;非免疫抗体库包括天然抗体库、半合成抗体库和全合成抗体库。
天然抗体库是采用不经过免疫的淋巴细胞构建的抗体库,半合成抗体库是人工合成一部分可变区序列与另一部分天然序列组合构建的抗体库,而全合成抗体库是指抗体可变区序列全部由人工合成。非免疫抗体库的优点是抗体均来源于人类,是完全的人源化抗体,但亲和力通常较低,除非生成大量
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