分子生物学载体课件.pptxVIP

;载体的功能;理想载体至少必备的条件;目前的主要载体;5;大肠杆菌的质粒;;质粒DNA的空间构型;质粒空间构型与电泳速率 分子量相同的，scDNA最快、l DNA次之、ocDNA最慢。;1.1 质粒的生物学基本特性;;质粒的不相容性分子机制;;;1.2 质粒的类型;1.2 质粒的类型;1.3 质粒的命名;;;;（4） 插入失活型质粒载体 载体的克隆位点位于其某一个选择性标记基因内部。;;;如何阅读质粒图谱;如何阅读质粒图谱;如何阅读质粒图谱;;;克隆位点：10个连续的单一限制酶切位点，位于lacZ’ 基因的5’端。 选择标记：Ampicillin 抗性和 lacZ 的 α 肽互补（蓝 白斑）相结合。;5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖;31;32;33;34;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷;36;37;38;39;;T4 Bacteriophage;;;;;iiiiii));;2.3.2 M13 噬菌体;;;RF-DNA(复制型DNA) ? +DNA转译与包装相关的蛋白质 RFDNA达到200个拷贝时, +DNA被单链特异的DNA结合蛋白结合,阻断-DNA的复制只能以-DNA为模板复制新的+DNA 新的+DNA立即被积累在细胞内的壳蛋白包装成新的噬菌体;M13 DNA载体的构建：;M13系列载体的优点;λ 噬菌体的生物学特性： 生