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西瓜枯萎病诱导表达基因的抑制消减杂交文库构建及其EST分析的中期报告
本研究旨在构建西瓜枯萎病(WMV)诱导表达基因的抑制消减杂交(RNAi)文库,并进行EST分析。为此,我们首先收集了受WMV感染的西瓜叶片样本,提取总RNA并构建cDNA文库。随后,通过PCR扩增,将目标基因的片段插入RNAi载体中,并转化到大肠杆菌中进行扩增和纯化。最后,将纯化的RNAi载体经过杂交消减和PCR筛选,得到了抑制消减杂交文库。
接下来,我们进行了EST分析,获得了大约500个EST序列。通过BLAST比对,我们发现这些序列覆盖了多个生物学过程和细胞组件。其中,一些基因与植物抗病相关的信号传导通路、光合作用和代谢过程相关。此外,我们发现还有一些序列与WMV本身的基因有显著的同源性,这表明这些基因可能在WMV感染过程中起重要作用。
综上所述,我们成功构建了西瓜WMV诱导表达基因的RNAi文库,并通过EST分析初步鉴定了一些与WMV感染和植物抗病相关的基因。本研究为进一步研究WMV与植物相互作用的分子机制提供了重要的资源和基础数据。
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