《诊断学》第9版课件—实验诊断之其他检测.pptxVIP

《诊断学》第9版课件—实验诊断之其他检测主讲人：XXX 1234第二节 基因诊断第三节 流式细胞术及其临床应用第一节 染色体检测第四节 床旁检测目录CONTENTS 1染色体检测 一、染色体检查、染色体命名和书写方法1.染色体检查 将待分析的细胞进行短期培养后，经过特殊制片和显带技术，在光学显微镜下观察分裂中期的染色体，确定染色体的数目及结构是否发生畸变，是确诊染色体病的基本方法染色体检查的标本除常用外周血外还可以用骨髓细胞、皮肤细胞、黏膜和羊水中的细胞等 2.染色体命名 根据人类细胞遗传学命名的国际体制（ISCN），人类46条染色体按其长短和着丝粒的位置编为A～G7组，包括1～22号及X和Y染色体。男性为46，XY；女性为46，XX根据各染色体上显带特点，将染色体划区分布，p表示短臂，q表示长臂。 “2P35”则表示2号染色体短臂3区5带一、染色体检查、染色体命名和书写方法 3.核型分析及其书写 核型书写有统一格式，其书写顺序为：染色体数目、性染色体、染色体异常。t表示易位：inｖ表示倒位，iso或i表示等臂染色体，ins表示插入，del表示缺失，r表示环状染色体。“-”表示丢失，“+”表示增加等，第一括号内是累及染色体的号数，第二括号内是累及染色体的区带，其中p表示短臂，q表示长臂。一、染色体检查、染色体命名和书写方法 二、染色体异常及染色体病1.染色体异常包括染色体数目异常和结构异常。2.根据先天性和获得性分为先天性和获得性染色体异常。3.根据常染色体和性染色体分为常染色体病和性染色体病。 病名染色体变化频率主要症状常染色体异常 Down综合征＋211/1000智能障碍、短头Edwards综合征+181/12000发育障碍、 小头Patau综合征+131/5000小头、小眼球，兔唇性染色体异常 Turner 综合征XO，xpXO/XX1/10000矮小、性发育不全Klinefeter综合征XXY1/1000女性样乳房、小睾丸YY综合征XYY1.5 /1000身材特别高、睾丸功能轻度障碍先天性染色体病病例二、染色体异常及染色体病 2基因诊断 一、基因诊断的含义 基因诊断是在基因水平上对疾病或人体的状态进行诊断。它是以遗传物质（如DNA或RNA）为检查对象，利用分子生物学技术，通过检查遗传物质结构或表达量变化与否来诊断疾病的方法。 内容评价基因突变检测如点突变、基因片段的缺失或插入、基因重排等不同类型基因突变的检测基因连锁分析临床的一些疾病的致病基因尚不清楚，很难用基因突变的检测诊断，对这些遗传疾病采用基因连锁分析基因表达分析如mRNA拷贝定量检测及mRNA长度分析等。mRNA检测在基因表达水平上为基因功能是否正常提供了直接依据病原体诊断外来入侵病原微生物遗传物质的检测 基因诊断的主要内容一、基因诊断的含义 二、基因诊断在诊断学中的地位传统的疾病诊断方法：主要是以疾病的表观改变为依据，不能及时作出明确的诊断。基因诊断：病因的诊断，既特异又灵敏。（1）可以揭示尚未出现症状时与疾病相关的基因状态；（2）可以对表观异常不明显或不特异的携带者及某种疾病的易感者做出诊断和预测；（3）对确定有遗传疾病家族史的个体或产前的胎儿是否携带致病基因的检测具有指导意义。 三、基因诊断的常用技术（一）核酸分子杂交技术1.核酸分子杂交：两条互补单链核酸（DNA或RNA）在一定条件下按碱基互补原则退火形成双链的过程。2.分子杂交方法的共同点（1）应用了核酸序列的复性原理。（2）采用了标记探针：同位素或非同位素标记的短片段特异DNA或RNA。 方法评价Southern印迹杂交 一种特定检测DNA片断的方法。Southern印迹的转印方法有毛细管虹吸印迹法、电转法、真空转移法临床上主要用于进行疾病的RFLP连锁分析、基因缺失诊断Northern印迹杂交一种研究RNA的方法，可用于测定细胞的总RNA或mRNA分子量的大小斑点杂交一种快速、简便、既可检测DNA又可检测RNA的方法，可同时检测多个样品，既可进行定性还可以进行半定量 原位杂交（ISH） 在保持细胞基本形态的情况下，用同位素或非同位素标记的探针与细胞内的DNA或RNA进行杂交。可同时检测多种DNA或RNA的情况原位杂交由于是原位检测，因此在对特定DNA或RNA进行检测的同时还可对其进行细胞及基因组内定位常用的核酸分子杂交技术与评价三、基因诊断的常用技术 （二）DNA测序1.DNA测序：测定DNA一级结构2.临床意义（1）DNA测序能直观地反映出DNA序列的变化（2）是诊断未知突变基因的最直接的方法（3）在遗传病和肿瘤的诊断、法医学的鉴定中具有非常重要的意义三、基因诊断的常用技术 方法评价双脱氧链终止法目前应用