巢蛋白过表达转基因小鼠的建立及巢蛋白过表达对肝脏增殖的影响的中期报告.docxVIP

巢蛋白过表达转基因小鼠的建立及巢蛋白过表达对肝脏增殖的影响的中期报告 本研究旨在建立巢蛋白过表达转基因小鼠模型，并探究巢蛋白过表达对肝脏增殖的影响。本期报告主要介绍了实验设计和初步实验结果。 实验设计： 1. 构建巢蛋白过表达载体：采用pcDNA3.1(+)作为载体，克隆巢蛋白基因（NP）序列至该载体中，构建巢蛋白过表达载体（pcDNA3.1(+)-NP）。 2. 小鼠基因编辑：使用CRISPR/Cas9技术在小鼠胚胎干细胞中敲除内源性NP基因，并在敲除的同时转染构建的巢蛋白过表达载体，使得转基因小鼠体内过表达NP。 3. 鉴定转基因小鼠：通过PCR和Western blotting技术确认转基因小鼠的基因组中成功敲除了NP基因并过表达了NP蛋白。 4. 探究巢蛋白过表达对肝脏增殖的影响：将转基因小鼠和野生型小鼠随机分为实验组和对照组，实验组小鼠接受肝脏局部切除术后，观察肝脏再生情况并比较两组小鼠的差异。 初步实验结果： 1. 巢蛋白过表达载体构建成功：通过PCR检测和测序确认巢蛋白基因已成功合成至pcDNA3.1(+)载体中。 2. 基因编辑和转基因鉴定：通过PCR和Western blotting技术确认转基因小鼠体内成功敲除了NP基因并过表达了NP蛋白，证明CRISPR/Cas9技术和构建的巢蛋白过表达载体均已成功应用。 3. 肝脏再生实验：由于时间有限，目前只仅进行了少量实验，结果显示转基因小鼠的肝脏再生能力可能存在一些差异。然而，数据仅有限备份，需要进一步扩大实验量和加强数据分析才能得出更加可靠的结论。 总之，本期报告介绍了建立巢蛋白过表达转基因小鼠模型的实验设计和初步实验结果，为后续的实验提供了一定的基础。但仍需进行更多更深入的实验，以探究巢蛋白过表达对肝脏增殖的影响，并为深入研究巢蛋白在肝脏再生中的作用提供理论依据。