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- 2023-11-03 发布于上海
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铜抗性全细胞传感器的构建和表达的中期报告
目前,我们正在进行构建和表达铜抗性全细胞传感器的研究。以下是我们的中期报告:
1. 构建基因组 DNA
我们成功地合成了包含铜抗性基因的DNA序列,并将其插入到能够自主复制的质粒中。我们使用PCR技术进行了验证,证实了目标DNA序列在质粒中的存在。
2. 转化大肠杆菌
我们使用了化学转化法将构建好的质粒DNA转化到了大肠杆菌DH5α菌株中。我们通过筛选单个克隆,并用PCR和DNA测序技术验证了铜抗性基因在菌株中的存在且构建没有错误。
3. 表达铜抗性基因
为了实现铜抗性基因的表达,我们将构建的基因组DNA片段插入到了一个表达向量pET-28a(+)中。我们通过电泳测试验证了质粒的正确性,并将其转化到了大肠杆菌Bl21(DE3)中。接下来,我们用IPTG诱导表达,并通过Western Blot技术验证有目标铜抗性蛋白的表达。
4. 传感器构建
我们基于上述的表达系统构建了铜抗性全细胞传感器。我们计划在接下来的研究中对此进行更为深入的验证,并将其用于研究铜的存在和浓度变化对微生物的影响。
总的来说,我们在铜抗性全细胞传感器的构建和表达方面已经取得了初步的进展。我们相信,这项研究将为微生物的铜抗性和铜污染的监测提供新的解决方案。
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