利用hplc-ms法检测细菌发酵液中的n-酰基-高丝氨酸内酯类化合物.docxVIP

利用hplc-ms法检测细菌发酵液中的n-酰基-高丝氨酸内酯类化合物 根据这项研究，某些具有密度依赖的革兰氏阴性疾病通过生成氮丙烯酸（ahl）高丝氨酸酯类（ahbs）信号分子来调节某些生理特征的表现。目前AHLs分子定性检测的方法,还停留在Shaw等人1997年建立的薄层层析与细菌生物感应器相结合(TLC-Biosensor)的方法。TLC-Biosensor方法是一种有效分析AHLs的分析方法,不需要昂贵的硬件设备,比较敏感、省时。但也存在很多不足,首先不同的细菌生物感应器对不同的AHLs具有不同程度的敏感,而且一种细菌生物感应器只能检测酰基侧链在一定范围的AHLs,细菌生物感应器的检测灵敏度还受本身状态的影响。另外,必须有标样的情况下才能定性检测。因此,建立一种高效、灵敏、特异检测AHLs的方法非常有必要。 所有的AHLs分子均含有一个高丝氨酸内酯环和4～14个碳不等的酰基侧链,该特征性内酯环结构在质谱鉴定过程中不会被破坏,总保持m/z为102的一个特征碎片,AHLs分子另一个典型特征是其相对分子质量具有172+14n,以14递增的规律。因此,本文根据AHLs的典型特征以C6-HSL、N-3-oxo-C8-HSL为标样建立了LC-ESI/MS检测AHLs化合物的方法,利用该法对细菌发酵液中的AHLs分子进行检测。 1 实验部分 1.1 ahls的生物传感检测 假单胞菌FML0