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- 2023-11-05 发布于上海
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小鼠UHS启动子-蜘蛛拖丝蛋白基因表达载体构建及其在体细胞中整合的中期报告
该研究旨在构建小鼠UHS启动子-蜘蛛拖丝蛋白基因表达载体,并将其引入体细胞中,实现基因的表达。本中期报告主要介绍了已经完成的实验内容及结果。
首先,我们通过PCR技术从小鼠基因组DNA中扩增出UHS启动子片段,并将其克隆到pGL3-basic质粒载体中,构建了小鼠UHS启动子报告载体。
其次,我们从蜘蛛拖丝蛋白基因组DNA中扩增出完整的蜘蛛拖丝蛋白基因片段,并将其克隆到pcDNA3.1质粒载体中,构建了蜘蛛拖丝蛋白基因表达载体。
然后,我们将UHS启动子报告载体和蜘蛛拖丝蛋白基因表达载体进行连接,构建了小鼠UHS启动子-蜘蛛拖丝蛋白基因表达载体。
最后,我们将构建好的表达载体引入培养的293T细胞和Hela细胞中,通过Western Blot分析检测表达效果。结果显示,表达载体在293T细胞和Hela细胞中均成功表达了蜘蛛拖丝蛋白基因。
综上,我们成功地构建了小鼠UHS启动子-蜘蛛拖丝蛋白基因表达载体,并在体细胞中实现了基因的表达,为下一步深入研究奠定了基础。
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