小叶杨耐高温、低温基因的克隆与表达的中期报告.docxVIP

小叶杨耐高温、低温基因的克隆与表达的中期报告 本实验旨在克隆和表达小叶杨的高温、低温耐受基因。在实验的前期，我们首先从小叶杨的基因组中筛选出潜在的高温、低温耐受基因，并进行了PCR扩增，成功得到了多个预期大小的PCR产物。随后，我们将PCR产物进行酶切、连接、转化等步骤，最终成功地将目标基因插入到表达载体中，构建了表达载体pET30a-heat和pET30a-cold。 在构建完表达载体后，我们将其转入大肠杆菌BL21中，利用IPTG诱导表达目标基因。通过SDS和Western Blot分析，我们发现表达载体pET30a-heat和pET30a-cold成功地表达了目标蛋白，表明克隆和表达工作取得了初步成功。 接下来，我们将进行蛋白纯化和功能鉴定的工作。具体来说，我们将使用亲和层析纯化法纯化目标蛋白，并利用Western Blot和质谱等技术手段进行鉴定；同时，我们还将进行功能测试，以评价目标基因的高温、低温耐受能力。我们计划在未来的实验中，进一步优化蛋白纯化方案，并进行更加准确、详细的功能测试和表达分析，以深入了解小叶杨的高温、低温耐受机制。