《标准文本-金线莲共生萌发繁育技术规程》.docxVIP

Q/LB.□XXXXX-XXXX PAGE 2 ICS FORMTEXT 65.020.40 CCS FORMTEXT GXAS FORMTEXT B 66 团体标准 T/ FORMTEXT GXAS FORMTEXT XXXX— FORMTEXT XXXX FORMTEXT ????? FORMTEXT 金线莲共生萌发繁育技术规程 FORMTEXT Technical code of practice for symbiotic seed germination and breeding of anoectiochilus roxburghii FORMDROPDOWN FORMTEXT ????? FORMDROPDOWN FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 广西标准化协会??发布 STYLEREF 标准文件_文件编号 T/GXAS XXXX—XXXX PAGE 3 STYLEREF 标准文件_文件编号 T/GXAS XXXX—XXXX PAGE 2 金线莲共生萌发繁育技术规程 范围 本文件界定了金线莲（Anoectochilus roxburghii）共生萌发繁育涉及的术语和定义，规定了金线莲共生萌发繁育菌剂的制备、人工授粉、共生萌发繁育方法、种苗栽培管理的技术要求。 本文件适用于广西行政区域内金线莲共生萌发繁育的技术。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6001 育苗技术规程 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 GB 15618 土壤环境质量标准 GB 20287 农用微生物菌剂 NY?525 有机肥料 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 共生萌发 symbiotic seed germination 兰科植物种子在菌根真菌侵染下，依靠菌根真菌提供能量和营养物质进行萌发的过程。 原球茎 protocorm 兰科植物种子萌发过程中的一种形态学结构，种子的幼胚吸水膨胀，中部的胚细胞分裂增殖，突破合点端种皮形成球形或椭球形结构。 菌剂的制备 菌根真菌的分离 选取野生金线莲健壮幼苗根状茎的突起部位，清水下冲洗掉表面污物，用光学显微镜观察，筛选有菌丝团定植的根部组织作为菌根真菌分离的材料，然后在超净工作台上用75％酒精溶液表面消毒10?s～30?s，再选用3％ NaClO溶液消毒5?min～10?min，无菌水冲洗5次，切成1?mm～2?mm 的小片，接种于PDA培养基上，28?℃培养。 菌根真菌的纯化 当真菌菌丝从根部切片边缘处长出时，挑取最外侧菌丝接种于PDA培养基上，28?℃恒温培养。并不断纯化，直至获得真菌的纯培养。 有效菌根真菌的筛选 采用菌叶实验：将金线莲种子撒播在已培养有真菌的山毛榉科树叶上共生培养，观察金线莲种子的萌发情况，筛选有效菌根真菌。筛选出的真菌产品技术指标和无害化指标符合附录B和附录C。 菌种的贮存 在3?℃～5?℃无污染的环境贮存。 人工授粉 亲本的选择 选择植物学性状一致、农艺性状优良、生长健壮、无病虫害的金线莲植株分别作为父母亲本。 授粉 在上午8～10点，选取开放2?d～4?d的花朵，用牙签取父本蕊柱上呈浅黄色的花粉块置于母本花的柱头蕊腔内，授粉后套袋。 果实采收 授粉后正常水肥管理，采收生长80?d～90?d的成熟饱满、无病虫侵扰、无开裂的蒴果。 共生萌发繁殖方法 菌种的活化 将贮存的菌种转接到活化培养基上，培养基配方参见附录A.1，制备成液体共生菌种备用。 共生萌发培养 先将液体菌种接种到共生萌发培养基上，培养基配方参见附录A.2，待共生真菌长满基质后，再切开金线莲果荚，将种子均匀撒播在培养基质上，进行遮光暗培养60?d～70?d，种子萌发形成原球茎，并逐步分化成具叶、根的小苗。 壮苗培养 将小苗进行光照培养，光照度为1 500?lx～2 000?lx，光照时间为10?h/d～14?h/d，小苗逐渐长高形成健壮菌根化植株。 培养环境条件 温度为23?℃～27?℃，空气相对湿度60％～70％。 种苗的栽培管理 栽培场地条件 可在设施大棚内或林下进行栽培，适宜的环境条件为温度20?℃～30?℃、湿度75％～90％、光照强度3 000?lx～4 000?lx。 基质 腐殖土、草炭土、椰糠等按适宜比例配制。 移栽 基质铺厚度5?cm～10?cm，以1～