第七章发酵工程制药_生物技术制药.pptVIP

高空取气管是远离地面几十米的管子。 地面附近空气中所含的微生物和灰尘等均比高空空气中含的多，每升高10米，空气中杂菌可降低一个数量级 因此从高空取气要比从低空取气有利得多。 本文档共128页；当前第62页；编辑于星期三\9点27分 油水分离器 其内部同时采用直接拦截，惯性碰撞，布朗扩散及凝聚等机理，能有效地去除空气中的水、油雾、尘埃，内部不锈钢丝网可清洗，使用寿命长。 本文档共128页；当前第63页；编辑于星期三\9点27分 发酵车间的空气过滤器 本文档共128页；当前第64页；编辑于星期三\9点27分 二、培养基和灭菌 （一）培养基 C源： N源： 无机盐： 前体，促进剂，抑制剂 本文档共128页；当前第65页；编辑于星期三\9点27分 2.培养基的类型 孢子培养基：一般用固体培养基，N源不能丰富如：小米或麸皮培养基 种子培养基：速效的C,N源，与发酵培养基过渡 发酵培养基：迟效与速效的C,N源搭配，加前体等 本文档共128页；当前第66页；编辑于星期三\9点27分 （二）灭菌方法 1.空罐灭菌：高压水蒸气，消灭死角 当培养基（或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌 蒸汽下进上出 本文档共128页；当前第67页；编辑于星期三\9点27分 2.实罐灭菌：效果最好，121度，30-50分钟 三路进汽：直接蒸汽从通风、取样和出料口进入罐内直接加热，直到所规定的温度，并维持一定的时间。 本文档共128页；当前第68页；编辑于星期三\9点27分 3.连续灭菌：营养破坏最少，128-138度，8-12分钟。 本文档共128页；当前第69页；编辑于星期三\9点27分 发酵的流程 空气 空气净化处理 保藏菌种 斜面活化 扩大培养 种子罐 主发酵 碳源、氮源、无机盐等营养物质 灭菌 产物分离纯化 成品 本文档共128页；当前第70页；编辑于星期三\9点27分 二、种子的制备 种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。 谷氨酸生产的种子制备 斜面菌种 →一级种子培养 →二级种子培养 →发酵 本文档共128页；当前第71页；编辑于星期三\9点27分 1、斜面 培养基：蛋白胨 1%，牛肉膏1%，氯化钠 0.5 培养基特点：有利于菌体的生长，原料比较精细 培养条件：32℃，生长18-24小时 生长斜面要求：生长良好，所使用斜面连续传代不超过3次 本文档共128页；当前第72页；编辑于星期三\9点27分 2. 一级种子（摇瓶） 培养条件：于1000ml三角瓶中，装液200-250ml, 32℃培养12h 培养基：葡萄糖2%，尿素0.5%，玉米浆 2.5%，K2HPO4 0.1% 培养基特点：有利于菌体的生长，所使用的原料已经基 本接近于发酵培养基 本文档共128页；当前第73页；编辑于星期三\9点27分 3. 二级种子(种子罐) 培养条件：在种子罐中培养（容积为发酵罐的1%(10%)）， 32℃培养7-10个小时 培养基：和一级种子相似，其中葡萄糖用水解糖代替， 浓度为2.5% 培养基的特点：长菌体，更接近于发酵培养基 本文档共128页；当前第74页；编辑于星期三\9点27分 实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此现象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。 生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。 种子制备的过程 本文档共128页；当前第75页；编辑于星期三\9点27分 二、微生物的发酵方式 分批培养 补料分批培养 连续培养 本文档共128页；当前第76页；编辑于星期三\9点27分 一、分批发酵 简单的过程，培养基中接入菌种以后，没有物料的加入和取出，除了空气的通入和排气。整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度等参数都随时间变化。 优点 操作简单，周期短，染菌机会少，生产过程和产品质量容易掌握 缺点 产率低，不适于测定动力学数据 本文档共128页；当前第77页；编辑于星期三\9点27分 本文档共128页；当前第78页；编辑于星期三\9点27分 分批培养中微生物的生长 迟滞期 对数生长期 稳 定 期 死亡期 本文档共128页；当前第79页；编辑于星期三\9点27分 迟滞期，菌体没有分裂只有生长。 对数生长期,当细胞内的与细胞分裂相关的物质浓度达到一定程度，细胞开始分裂，这时细胞生长很快。 随着细胞生长，培养液中的营养物减少