不同显色系统对免疫组织化学结果的影响.docxVIP

不同显色系统对免疫组织化学结果的影响 在免疫组化染色时，可以选择不同的显色剂，最终产品的颜色可以是不同的。然而，常用的是dab-苏木素系统，但对某些组织的抗感染deb的表现出非常灵活。许多科学家仍然使用这种系统，但效果甚微。我们在研究食管肌间神经发育中发现, 不同的显色系统对神经元的显示有不同的敏感性, 但相关报道很少。为此, 我们选用辣根过氧化物酶系统的3种显色剂和复染剂, 组合成不同的显色系统, 比较结果的差异, 以期对显色系统的选用提供参考。 1 材料和方法 1.1 灌注固定、切片 生后14 d的正常SD大鼠12只 (温州医学院实验动物中心提供) , 经0.1 mol/L PB-4%多聚甲醛常规灌注固定后取食管下端, 石蜡包埋后选用经HE染色证实食管结构良好的10个蜡块再进行连续切片 (4μm) 备用。一抗为兔抗nNOS购自Chemicon公司, 二抗试剂盒 (kit9706) 、AEC、核快红、苏木素购自福建迈新生物技术开发公司, DAB购自上海长岛生物技术有限公司, 4-CN购自深圳康百得生物科技有限公司, 甲基绿为RD公司产品。 1.2 方法 1.2.1 组 根据显色剂和复染剂的不同颜色特性分7组, 依连续切片的顺序每组有10张切片, 分4次在不同时间、相同条件下完成实验。 1.2.2 nts-pcr检测 (1) 切片脱蜡水化后, PBS冲洗3×3 min。 (2)