发酵工程学课件.pptxVIP

氨基酸生产工艺;;氨基酸;氨基酸的用途;;氨基酸的生产方法;酶法：利用微生物细胞或微生物产生的酶来制造氨基酸。 提取法：蛋白质水解，从水解液中提取。胱氨酸、半胱氨酸和酪氨酸 合成法：DL-蛋氨酸、丙氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸。 传统的提取法、酶法和化学合成法由于前体物的成本高,工艺复杂,难以达到工业化生产的目的。;;;氨基酸发酵生产发展的历史回顾;菌株的育种;2.1　用野生株的方法 ;2.2　用营养缺陷变异株的方法;2.3　类似物抗性变异株的方法;2.4 体内及体外基因重组的方法;代谢工程在阐明代谢途径及其调控规律的基础上，应用重组DNA技术可以改变代谢途径分支点上的流量或引入新的代谢步骤与构建新的代谢网络。 其主要步骤为: 鉴定目标代谢途径涉及的酶(特别是限速酶); 取得酶基因，必要时可用蛋白质工程技术，如定点诱变，基因剪接等，使蛋白具有新的特点(增强活性或稳定性、解除反馈抑制等); 将一种或多种异源的或改造后的酶基因与调节元件一起克隆进目标生物; 使调节元件的作用及培育条件最优化。 ;3.1　载体-受体系统及克隆表达的研究 ;3.1.2　载体的构建 ;3.1.3　基因转移手段;氨基酸发酵的代谢控制;控制发酵的条件;控制细胞渗透性;控制旁路代谢;降低反馈作用物的浓度;消除终产物的反馈抑制与阻遏作用;促进ATP的积累，以利氨基酸的生物合成;氨基酸发酵的工艺控制;培养基;;;4、磷酸盐：对发酵有显著影响。不足时糖代谢受抑制。 5、镁：是已糖磷酸化酶、柠檬酸脱氢酶和羧化酶的激活剂，并促进葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活力。 6、钾：促进糖代谢。谷氨酸产酸期钾多利于产酸，钾少利于菌体生长。 ;;;pH对氨基酸发酵的影响及其控制;;温度对氨基酸发酵的影响及其控制;氧对氨基酸发酵的影响及其控制;谷氨酸生产工艺;;;;;;二、菌种扩大培养 1、斜面培养：主要产生菌是棒状杆菌属、短杆菌属、小杆菌属、节杆菌属。 我国各工厂目前使用的菌株主要是钝齿棒杆菌和北京棒杆菌及各种诱变株。 生长特点：适用于糖质原料，需氧，以生物素为生长因子。 斜面培养基：蛋白胨、牛肉膏、氯化钠组成的pH7.0-7.2琼脂培养基，32℃培养18-24h。 ;2、一??种子培养：由葡萄糖、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸铁及硫酸锰组成。pH6.5-6.8。1000ml装200-250ml振荡，32℃ 培养12h。 3、二级种子培养：用种子罐培养，料液量为发酵罐投料体积的1％，用水解糖代替葡萄糖，于32℃ 进行通气搅拌7-10h。种子质量要求：二级种子培养结束时，无杂菌或噬菌体污染，菌体大小均一，呈单个或八字排列。活菌数为108-109 /ml。;三、谷氨酸发酵;3、菌体生长停止期：谷氨酸合成。 措施：提供必须的氨及pH维持在7.2-7.4。大量通气，控制温度34-37 ℃。 4、发酵后期：菌体衰老，糖耗慢，残糖低。 措施：营养物耗尽酸浓度不增加时，及时放罐。 发酵周期一般为30h。;谷氨酸发酵控制;;;;四、谷氨酸的提取;2、离子交换法：用阳离子交换树脂提取吸附谷氨酸形成的阳离子，再用热碱洗脱，收集相应流分，再加盐酸结晶。;谷氨酸发酵研究新进展;非糖质原料的谷氨酸发酵;  发酵工程基本操作;第一节 严格消毒灭菌;（一）灭菌（sterilization）;;（二）消毒（disinfection）;（三）防腐（antisepsis）;（四）化疗（chemotherapy）;除菌的方法 ;（一）高温杀菌作用的种类 ;;2．湿热灭菌法;（1）常压法;;（2）加压法;?连续加压灭菌法;连续加压灭菌法优点 ;（二）影响加压蒸汽灭菌效果的因素 ;;;（三）高温对培养基成分的有害影响及其防止 ;消除高温有害影响的措施;;;(二)灭菌设备?l、高压蒸汽灭菌?? 生产中使用高压蒸汽灭菌锅的型号很多 手提式灭菌锅，容量小，多用于母种培养基灭菌。 立式或卧式灭菌锅较大，多用于原种或少量栽培种培养基的灭菌，一般能装几十瓶或几百瓶。 灭菌柜要和蒸汽锅炉配套，用于大量的原种和栽培种培养基的灭菌，一次能装几百至几千瓶(袋)。但投资太大，适合大型菌种场使用。;;第四节? 培养基的灭菌 ;３、湿热灭菌的基本原理： 　　湿热灭菌是直接用蒸汽灭菌。蒸汽冷凝时释放大量潜热，并具有强有强大的穿透力，在高温和水存在时，微生物细胞中的蛋白质极易发生不可逆的凝固性变性，致使微生物在短时间内死亡。;;（一）理论灭菌时间 ;;（二）灭菌温度与菌反应速度常数的关系 ;二、影响培养基灭菌的因素 ;;;三、灭菌的实际操作 ;;培养基连消工艺流程图 ;;;;;三、化学杀菌剂或制菌剂 ;（一）表面消毒剂;;消 毒 试 验 ;灭菌效果监测;２、紫外线消毒效果监测 ⑴ 微型紫