核“芯”13PCR技术及应用公开课教案教学设计课件资料.docxVIP

核“芯”13　PCR技术及应用 (时间：20分钟) 1.(2021·xxxx联考)奶牛体内含有溶菌酶基因(Lyz)，但表达水平较低。研究人员试图通过替换启动子的方法，实现Lyz基因在奶牛乳腺细胞中的高效表达。回答下列问题： (1)溶菌酶可破坏细菌的________，导致细菌过度吸水破裂而死亡；与使用抗生素相比，利用溶菌酶杀菌具有________________________________(至少答出两点)等优点。 (2)从奶牛乳腺上皮细胞提取总RNA，经________获得cDNA，以cDNA为模板进行PCR扩增，需要加入Lyz基因的________种引物。PCR扩增的前提是要根据________________________设计引物，引物与母链结合后控制不同温度进行反复循环。 (3)对Lyz基因片段和带有绿色荧光蛋白基因的质粒进行连接，构建重组质粒。重组质粒中绿色荧光蛋白基因的作用是作为________基因。为保证Lyz基因在奶牛乳腺细胞中高效表达，可用________的启动子替换原有启动子。将重组质粒转入奶牛乳腺细胞，再利用荧光显微镜检测奶牛乳腺细胞中______________________，来判断奶牛Lyz基因乳腺特异性表达质粒是否构建成功。 答案　(1)细胞壁　无毒、无害、无残留、抗菌范围广、安全性高、不产生抗药性等(答出两点即可) (2)反转录　两　一段已知目的