酶联免疫吸附试验诊断技术课件.pptxVIP

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酶联免疫吸附试验诊断技术 61、辍学如磨刀之石,不见其损,日有所亏。 62、奇文共欣赞,疑义相与析。 63、暧暧远人村,依依墟里烟,狗吠深巷中,鸡鸣桑树颠。 64、一生复能几,倏如流电惊。 65、少无适俗韵,性本爱丘山。 一、免疫检测的基础知识 (一)抗原 (二)抗体 (三)抗原抗体反应 10/13/2023 6 (一)抗原(Antigen Ag) 抗原是能在机体中引起特异性免疫应 答的物质。可刺激机体产生体液免疫(抗 体)和引起细胞免疫(细胞因子)。能在 机体中产生抗体的抗原多为分子量大于 5000D的蛋白质,例如禽流感、新城疫、猪 瘟、口蹄疫等病毒。 10/13/2023 7 (二)抗体(Antibody Ab) 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白 (immunoglobulin, Ig)。 Ig分五类,即 IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定 有关的Ig主要为IgG和IgM。 抗体的产生 机体受抗原刺激后, B淋巴细胞产生相应 的抗体,含有抗体的血清称为抗血清( antiserum)。 10/13/2023 8 (三)抗原抗体反应 1、特异性结合并可逆 抗原与抗体结构可以形成特异性的抗原 抗体复合物,此过程是可逆的。 2、最适比例:前带和后带现象 3、敏感性 10/13/2023 9 (一) ELISA的基本原理 (二) ELISA的类型 二、 ELISA试验的原理 10/13/2023 10 底物现色 酶标复合物 样品稀释 包被(抗原或抗体) ELISA(间接)的操作步骤 10/13/2023 11 P E 1、间接法测抗体 2、双抗原夹心法测抗体 3、双抗体夹心法测抗原 4、竞争法测抗体 5、竞争法测抗原 6、捕获包被法测IgM抗体 7、液相阻断ELISA法 (FMD) 10/13/2023 12 三、酶联免疫吸附试验的特点 (一)灵敏度高 (二)特异性强 (三)简便、快速 (四)重复性好 (五)自动化程度高,适合大批量标准化检测 (六)安全 10/13/2023

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