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火焰无核葡萄花粉离体萌发试验 李桂荣;朱自果;李力;蔡祖国 【摘 要】Effects of sucrose, boric acid and Ca(NO3)2 on pollen germination and growth in vitro of Vitis vinifera cv. Flame Seedless were studied to select the optimal culture medium via single factor experiment and Li6 (4? orthogonal experimental design experiments. The results showed that sucrose had the most important effect on pollen germination and growth followed by boric acid and Ca(NO3)2. The optimal culture medium for pollen germination in vitro was solid culture media supplemented with sugar 250 g ?L1 , boric acid 0. 08 g ?L and Ca(NO3)2 0. 05 g ?L The pollon germination rate could reach 22. 22% when cultured on this medium.%以欧洲葡萄火焰无核的新鲜干燥花粉为试验材料,在不同浓度蔗糖、硝酸钙和硼酸单因素试验基础上开展正交试验,研究不同培养基对花粉的离体萌发和生长的影响,以筛选适宜火焰无核葡萄花粉离体萌发的培养基.结果表明:蔗糖对火焰无核葡萄的花粉离体萌发和花粉管生长的影响效果最大,硼酸的影响效果略差于蔗糖,最后是硝酸钙,其影响效果最小;花粉萌发的适宜培养基是:蔗糖250 g·L-1+硼酸0.08 g·L-1+硝酸钙0.05 g·L-1,萌发率达到22.22％. 【期刊名称】《西北林学院学报》 【年(卷),期】2012(027)006 【总页数】5页(P93-97) 【关键词】葡萄;火焰无核;花粉;培养基 【作 者】李桂荣;朱自果;李力;蔡祖国 【作者单位】河南科技学院园艺园林学院,河南新乡453003;河南科技学院园艺园林学院,河南新乡453003;临渭区农业技术推广中心,陕西渭南714000;河南科技学院园艺园林学院,河南新乡453003 【正文语种】中 文 【中图分类】S663.1 无核葡萄日益受到广大消费者的喜爱，培育新的适宜当地生产的无核葡萄新品种势在必行。选用无核葡萄优良品种为亲本，开展杂交育种可以培育品种，满足市场需求。实践过程中，父、母本的选择是获得无核葡萄杂交后代的前提。无核葡萄材料众多，其中欧洲葡萄火焰无核是从美国引进的一个优良品种［1－9］，在多年的杂交试验中发现，该品种作母本，存在人工去雄时操作较难，且落粒严重等问题；所以可选择火焰无核葡萄作为父本进行杂交。有关花粉生活力的研究较多［10－14］，但有关该葡萄品种花粉的研究目前尚少，因此开展火焰无核葡萄花粉生活力的研究具有重要意义。1 材料与方法1.1 试验材料试验材料采自河南新乡古固寨葡萄试验园内火焰无核葡萄初花期的新鲜花粉。选择生长健壮的植株，采下发育正常的花序，除去顶部发育较差的花蕾后用手指揉出花粉，平铺于光滑的纸盒上晾干散粉，充分干燥后倒入研钵中研磨，经过丝底小筛过滤后，装入小玻璃瓶内待用。1.2 试验方法蔗糖（因素A）、硼酸（B）和硝酸钙（C）3个因素单因素随机试验，研究各因子不同水平对火焰无核葡萄花粉萌发的影响；采用正交设计法L16（45）研究蔗糖（因素A）、硼酸（B）和硝酸钙（C）3因素组合对花粉离体萌发和花粉管生长的影响（表1），培养基添加琼脂7.0g·L－1，pH5.8。表1 蔗糖、硼酸和硝酸钙3个因子的不同质量浓度处理Table 1 Treatments of different concentrations of sucrose，boric acid and Ca（NO3）2水平因素蔗糖（A）／（g·L－1）硼酸（B）／（g·L－1）硝酸钙（C）／（g·L－1）1 100 0 0 2 150 0.04 0.05 3 200 0.08 0.10 4 250 0.12 0.15将配制好的培养基分别均匀的涂抹于凹玻片的凹槽内制作发芽床，轻轻将花粉抖落在培养基的表面，每处理重复3次，将凹玻片放入垫有湿润滤纸的培养皿中，置于25℃条件下的光照培养箱内培养，3 h后，在光学显微镜10×40倍下观察花粉萌发情况，以花粉管长度超过花粉粒直径作