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流氏细胞术蛋白标记检测具体方法及步骤 荧光标记抗体孵育细胞后，利用流式细胞检测仪比较不同条件处理 的实验组之间细胞表面蛋白的表达差异，是检测膜蛋白表达的首 选，粒成提供多达4色标记检测。 技术原理 细胞表面分子抗原的流式荧光检测是最常用的流式细胞分析方法之 一，使用目的蛋白的荧光抗体标记目的细胞，通过流式细胞仪来检 测有荧光信号的细胞，从而分析和判断待测细胞群体中目的蛋白表 达阳性率。比较不同条件处理的实验组之间，细胞表面蛋白的表达 差异。 常见问题 Q :流式细胞检测与western的区别？ A: （1）Western可以检测多种类型蛋白，但流式主要适合检测膜蛋 白，且抗体通常是直接和荧光基团相连； （2） Western测蛋白含量对抗体的量需要很少，一般1 : 1000 左右，而流式对抗体的需要量很大，一般1 : 50 ； （3） 流式细胞检测可以知道表达目的抗原的细胞占比情况， Western Blot只能比较样本间目的抗原平均表达情况。 结果展示 目的细胞按实验设计组别进行药物处理后，收集细胞悬液，离心， 用缓冲液洗涤，加细胞染色缓冲液重悬后，用PE标记的CD11b抗 体进行染色，染色结束后，用细胞染色缓冲液洗涤、重悬，进行流 式仪检测(Millipore，Guava easyCyte HT)，分析各实验组别 中CD11b阳性细胞百分比差异。