FBP17基因真核重组质粒构建及其L02细胞表达的中期报告.docxVIP

FBP17基因真核重组质粒构建及其L02细胞表达的中期报告 FBP17基因是细胞内的一种RhoGAP蛋白，可调控细胞骨架重构、细胞增殖和移动等生命活动。本实验旨在构建FBP17基因的真核重组质粒并在人肝癌细胞L02中进行表达研究。 首先，通过PCR法从人类基因组DNA中扩增FBP17基因全长CDS序列，将其克隆到真核表达质粒pEGFP-N3中，构建pEGFP-FBP17重组质粒。构建成功的质粒进行了限制性内切酶检测和测序验证，结果均符合预期序列。 接下来，将pEGFP-FBP17质粒转染至L02细胞中，同时以pEGFP-N3质粒转染作为空白对照。24小时后，通过荧光显微镜观察得到，转染L02细胞中pEGFP-FBP17质粒表达呈现明显的绿色荧光，而空白对照则未见绿色荧光，表达与未表达组相对应，表明pEGFP-FBP17质粒在L02细胞中成功表达。 总结：本实验成功构建了pEGFP-FBP17真核重组质粒，并通过荧光显微镜观察到其在L02细胞中的表达情况。下一步将进行WB和RT-PCR等分子生物学方法的研究，以探究FBP17基因在人肝癌细胞中的功能及其调控机制。