DB51T 2576-2019柳桉组织培养育苗技术规程.docxVIP

ICS 65.020.40 B 61 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 2576—2019 柳桉组织培养育苗技术规程 2019 - 04 - 16 发布 2019 - 05 - 01 实施 四川省市场监督管理局 发 布 I DB51/T 2576—2019 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 培养基配制 1 4 接种 2 5 初代培养 3 6 启动培养 4 7 增殖培养 4 8 生根培养 5 9 炼苗 5 10 洗苗 5 11 苗木移栽和管理 5 12 苗木出圃 6 附录 A（资料性附录） 柳桉组织培养培养基配方 7 附录 B（资料性附录） 柳桉苗木质量等级表 8 II DB51/T 2576—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的规定编写。 本标准由四川省林业和草原局提出并归口。 本标准由四川省市场监督管理局批准。 本标准起草单位：四川省林业科学研究院。 本标准主要起草人：郭洪英、黄振、李佳蔓、陈炙、辜云杰。 1 DB51/T 2576—2019 柳桉组织培养育苗技术规程 1 范围 本标准规定了柳桉(Eucalyptus Saligna)组织培养育苗技术的培养基配置、接种、初代培养、启动 培养、增殖培养、生根培养、炼苗、洗苗、移栽管理和出圃等技术流程。 本标准适用于柳桉在四川省内的组织培养育苗生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 6000 主要造林树种苗木质量分级 LY/T 1770-2008 桉树无性系组培快繁技术规程 LY/T 1882-2010 林木组织培养育苗技术规程 3 培养基配制 3.1 培养基选择 柳桉组织培养在不同阶段使用的培养基见附录A。 3.2 母液配制 3.2.1 水质要求 母液配制应使用蒸馏水、去离子水或超纯水。 3.2.2 大量元素配制 按照LY/T 1770-2008配制。 3.2.3 植物生长调节剂母液的配制 植物生长调节剂母液浓度宜配成0.1mg/mL～1mg/mL。 3.2.4 保存 母液容器上应当贴上标签，备注上名称、配制日期、浓度倍数。配制好的母液应置于4℃的冰箱中 冷藏保存。微量元素宜用棕色瓶保存。母液配制后应及时使用，贮藏时间不宜超过3个月。如发现有絮 状物或沉淀产生应停止使用。 3.3 培养基制作 3.3.1 母液吸取 2 DB51/T 2576—2019 按比例吸取母液放入烧杯中，加入蔗糖、卡拉胶和激素后，充分加热溶解并定容。 3.3.2 pH 调节 用1.0mol／LHCl或1.0mol／L NaOH调节培养基pH 6.0±0.2。 3.3.3 培养基分装 将未凝固培养基倒入240mL培养瓶并封口，培养瓶介质为玻璃或塑料。 3.4 培养基灭菌 具体操作参照LY/T 1882-2010。 3.5 培养基储存 灭菌后的培养基应注明编号和配置日期， 按用途和时间顺序分别置于培养基储藏室内， 储藏室内干 净无风、温度20 ℃,储存时间不应超过30 d。 4 接种 4.1 准备工作 4.1.1 人员准备 接种人员在进入接种室前应在缓冲间穿着专用工作服、拖鞋，佩戴口罩、帽子， 接种前用75%乙醇 擦拭双手。 4.1.2 器具准备 接种所用的盘子、镊子、剪刀等器具应先用布袋、报纸包裹，放置在高压灭菌锅内灭菌后再使用， 灭菌条件同3.4。 4.1.3 设备准备 开启工作台紫外灯15 min～20 min，期间禁止人员进入接种室；关闭紫外灯后，开启超净工作台风 机通风15min后；用75%乙醇擦拭工作台台面和两边挡板。 若使用电热灭菌器应在接种前15min将其开启。 4.1.4 培养瓶检查 对培养瓶进行检查，剔除污染、瓶裂、盖裂的培养瓶。 4.2 接种 4.2.1 器具消毒 将高温灭菌后的剪刀、镊子等器具用酒精灯或电热灭菌器再次高温处理，处理后应使其足够冷却， 避免烫伤培养材料。 4.2.2 分株 3 DB51/T 2576—2019 在无菌接种盘中， 用已冷却的工具将丛芽切分成小芽丛或单个茎段（茎段高度1 cm）后， 将小芽 丛或茎段接种至增殖培养基上，将1.5 cm的茎段接种到生根培养基上诱导生根。 4.2.3 接种密度要求 初代培养接种1个茎段/瓶，启动培养和增殖