丛枝菌根真菌对低温胁迫下番茄幼苗生长和相关生理指标的影响.docxVIP

丛枝菌根真菌对低温胁迫下番茄幼苗生长和相关生理指标的影响 番茄是一种喜温性食品，对温度反应敏感。其适宜生长发育温度为20~25 ℃,温度低于10 ℃生长发育受阻,5 ℃生长完全停止。低温在植物整个生育过程中均会造成不利影响,如冷害会造成植株苗弱、生长迟缓、萎蔫、黄化、局部坏死、坐果率低、产量降低和品质下降等不良影响。在北方日光温室冬春季生产中,低温逆境是影响番茄产量和质量的主要障碍之一。 丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)是兼有植物根系和专性营养共生真菌特性的一类内生菌根,主要由根中的菌丝、菌根、液泡及土中的菌丝和孢子等部分组成。研究表明:菌根共生后可以通过不同方式和途径影响植物的代谢过程,不仅能够影响植物的生长发育、水分和矿物质营养元素(N、P、Fe、Cu和Zn)的吸收和利用,还能增强植物的抗逆能力。近年来已有研究报道AMF可以提高玉米、小麦、韭菜和茄子的耐低温能力,但关于利用AMF提高番茄抗冷性方面的研究尚未见报道。本研究旨在阐明AMF提高番茄抗冷性的作用和可能生理机制,为提高番茄抗冷性提供一条新的有效途径。 1 材料和方法 1.1 种子催芽催芽 试验于2010年4—6月在中国农业科学院蔬菜花卉研究所试验温室进行,供试番茄品种为“中杂105号”,将饱满一致的种子于75%的酒精中浸泡5 min消毒后用去离子水冲洗干净,置于恒温箱中28 ℃条件下催芽。 接种菌种为产自澳大利亚的摩西球囊霉(Glomus mosseae,GM),菌剂为经三叶草扩繁的含有侵染根段、真菌孢子和沙土的复合物,孢子密度为3.8个/g。 1.2 方法 1.2.1 营养钵中接种菌种,制备不同基质的番茄或制备工艺 供试基质为草炭和蛭石按体积比1∶1混合均匀,于烘箱中160 ℃高温灭菌2 h,自然冷却后继续160 ℃烘2 h后放凉备用;采用高和直径均为10 cm的黑色塑料营养钵进行栽培,营养钵使用前用75%酒精擦洗消毒。试验设4个处理:1)常温不接菌(CK):基质+10 g灭菌接种物,昼/夜温度25/15 ℃;2)低温不接菌(L):基质+10 g灭菌接种物,昼/夜温度12/8 ℃;3)常温接菌(GM):基质+10 g菌剂,昼/夜温度25/15 ℃;4)低温接菌(LGM):基质+10 g灭菌接种物,昼/夜温度12/8 ℃。将发芽整齐的种子分别播于装有接种10 g菌剂和接种10 g灭菌接种物(保持营养物的一致)的基质的营养钵中育苗,常规管理。幼苗长至五叶一心时取长势一致的幼苗移到光照培养箱(光照设为200 umol/(m2·s))进行温度处理。每个处理番茄幼苗20株,重复3次。 低温处理前(0 d)、低温处理3和6 d,取各处理植株第4和5片叶分别测定各项生理指标。 1.2.2 测量 1 生长株高 分别于低温处理前(0 d)和低温处理6 d时,测量幼苗株高(从子叶到生长点的高度);分别将幼苗地上部和地下部用清水冲洗表面杂物,再用去离子水冲洗干净,擦干,称鲜质量,105 ℃杀青15 min,75 ℃烘至恒重,称干质量。 2 测定细菌根的侵蚀率 采用根段法。 3 2相对应的绿叶含量 采用SPAD-502(Konica,日本)叶绿素测定仪对番茄完全展开的第4片叶进行相对叶绿素含量的测定。 4 2测定可溶性蛋白质含量 采用Bradford考马斯亮蓝G-250法。 5 2测定电解质渗透性 采用电导法。 6 1测定了mda含量 采用硫代巴比妥酸法。 7 1测定氨基酸酶活性 SOD活性采用Giannopolitis等的方法;POD活性采用曾韶西等的方法;CAT活性采用Dhindsa等的方法。 8 分析和构图 每试验组设3个重复。所有数据均用Excel 2003软件进行分析和绘图,采用SPSS 13.0软件(Duncan法)进行差异显著性(P0.05)分析。 2 结果与分析 2.1 低温胁迫对番茄植株生长的影响 由表1可知,常温条件下接种AMF的番茄幼苗株高、地上部鲜质量和地下部干鲜质量增长量均显著高于对照(CK);低温胁迫下番茄植株生长受到抑制,其株高、地上部和地下部干鲜质量的增长量分别比对照下降34.48%、47.62%、36.99%、54.55%和38.64%;接菌(LGM)幼苗的株高、地上部和地下部干鲜质量的增长量分别比未接菌处理(L)提高了23.68%、63.64%、44.95%、60.00%和25.93%。接菌处理(LGM)明显缓解了低温胁迫对番茄植株生长的影响。 未接种番茄根系没有受到AMF的侵染,接种番茄根系菌根侵染率较高。常温条件下的菌根侵染率较高,达49.18%;低温胁迫下的菌根侵染率降低了38.33%。 2.2 低温胁迫对叶片叶绿素含量的影响 由图1可知,常温条件下接菌处理(GM)和对照(CK)番茄幼苗叶片中的相