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报告基因稳定转化BmN细胞测定BmNPV滴度方法的建立的中期报告 中期报告：基因稳定转化BmN细胞测定BmNPV滴度方法的建立 摘要： 为了便于研究与控制传染性病毒，建立一种基因稳定转化BmN细胞测定BmNPV滴度的方法。本研究利用pcDNA3.1/V5-His-TOPO质粒载体将GFP基因稳定转化进BmN细胞，并针对转化后的BmN细胞和非转化BmN细胞筛选出最佳繁殖条件，建立BmNPV滴度测定的方法。 材料与方法： 1.材料： pcDNA3.1/V5-His-TOPO质粒载体，BmN细胞，BmNPV，DMEM基础培养液，FBS，Penicillin-Streptomycin。 2.主要方法： 2.1 BmN细胞的培养 将BmN细胞放入DMEM培养基中，加入10％的FBS和1％的% Penicillin-Streptomycin，并在37℃、5％CO2的条件下培养。 2.2 GFP基因的转染 将pcDNA3.1/V5-His-TOPO质粒载体和Lipofectamine 2000混合，加入BmN细胞中转染24小时，以确保稳定转染。 2.3 GFP基因的筛选 筛选出稳定转染的BmN细胞，以便进行BmNPV滴度的测定。 2.4 BmNPV滴度的测定 将转化后的BmN细胞和非转化BmN细胞各分为5组，根据不同紫外线照射时间（0、1、3、5和7分钟）的条件下，将不同浓度的BmNPV病毒引入