第十章基因重组(要).pptVIP

左下角处有超级链接到配伍末端 （三）外源基因与载体的连接 1. 粘性末端连接 方式：(1)同一限制酶切位点连接 (2)不同限制酶切位点连接 配伍末端连接 非配伍末端连接 （二）克隆载体的选择和构建 本文档共91页；当前第62页；编辑于星期三\14点40分 Bam HⅠ切割反应 GGATCC CCTAGG T4 DNA连接酶 15oC GATCC G G CCTAG + 目的基因用 Bam HⅠ切割 载体DNA用Bam HⅠ切割 重组体 载体自连 目的基因自连 同一限制酶切位点连接 目 录 本文档共91页；当前第63页；编辑于星期三\14点40分 不同限制酶切位点（非配伍末端）的连接 Eco RⅠ切割位点 Bg lⅡ切割位点 + EcoRⅠ+ Bg lⅡ 双酶切 Eco RⅠ+ Bg lⅡ 双酶切 T4 DNA连接酶 15oC 重组体 配伍末端的连接情况和同一限制酶切位点连接相似。 目 录 本文档共91页；当前第64页；编辑于星期三\14点40分 2. 平端连接 适用于：限制性内切酶切割产生的平端 粘端补齐或切平形成的平端 本文档共91页；当前第65页；编辑于星期三\14点40分 目的基因 载体 限制性内切酶 限制性内切酶 T4 DNA连接酶 15oC 重组体 载体自连 目的基因 自连 目 录 本文档共91页；当前第66页；编辑于星