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第十二章 微生物学新技术在环境 工程中的应用
微生物新技术包括遗传诱变育种、基因工程、酶 工程、微生物制剂、生物表面活性剂等
1
将用麸曲或深层发酵的培养液除菌(或不除菌)后,  与淀粉等惰性填料混合、干燥制成粗酶
l 稀液体酶制剂
将培养液过滤除去菌体等杂质后,直接加稳定剂和防 腐剂作为商品出售。国内许多白酒厂用此种液态糖化酶制 剂糖化淀粉。
l 浓液体酶制剂
将培养液过滤除去菌体等杂质、浓缩后再加稳定剂和 防腐剂成商品。
第一节 固定化酶和固定化微生物 在环境工程中的应用
一、酶制剂剂型
l 干燥粗酶制剂
2
l 干燥粉状酶制剂
我国多数生产此种酶制剂。制备工艺如下:
①过滤培养液去菌体   浓缩   喷雾干燥   研磨   加稳定
剂、惰性填料   成商品
②过滤培养液去菌体   硫酸铵盐盐析和乙醇沉淀 研磨   加稳定剂、惰性填料   成商品
l 结晶酶
是经过高度纯化而结晶的固体酶制剂。
l 固定化酶
将酶和酶菌体固定在载体上,制成不容与水的固态酶, 可较长时间使用。
干燥
3
二、酶的提取
(一)预处理
l 胞外酶
培养液过滤或离心 后的清液
l 胞内酶
破碎细胞壁和质 膜后,再进行提取。
(二)酶的提取
l 水溶液提取法
l 表面活性剂提取法
l 丁醇提取法
三、酶的纯化提取
(一)浓缩
(二)去杂质
(三)纯化
l 盐析法
l 有机溶剂沉淀法
l 层析法
(四)结晶
4
从筛选、培育获得的优良菌种中提取活性极高的酶,再 用包埋等方法将酶固定在载体上,制成不溶于水的固态酶, 即固定化酶。
l 固定化微生物
以与固定化酶相同的固定化方法将酶活力强的微生物固 定在载体上,即成固定化微生物。
l 特性
稳定、降解有机物性能力强、耐、抗毒抗杂菌、耐冲击
四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法
(一)固定化酶和固定化微生物
l 固定化酶
负荷。
5
(二)固定化酶和固定化微生物的固定方法
l载体结合法
l交联法
l包埋法
l逆胶束酶反应系统
6
¯ 以共价结合、离子结合和物理吸附等方法 将酶固定在非水溶性载体上的方法
¯ 载体有葡萄糖、活性炭、胶原、多孔玻璃、 高岭土、硅胶等非水溶性载体。
¯ 微生物细胞与带2个以上功能团的非水溶性交联剂  进行交联,
¯ 稳定性好
¯ 反应激烈,会使细胞活性降低。
¯ 将微生物细胞包埋在半透性多聚物膜或凝胶小格中
¯ 操作简单、能保持微生物细胞的多酶体系、对活性 影响较小
¯ 在废水处理中得到广泛的研究,是固定化微生物最 常用的方法。
载体结合法
包埋法
交联法
7
l逆胶束酶反应系统
表面活性剂的两性分子在有机溶剂中自发形 成聚集体,其亲水性一端连接成逆胶束的极性核, 水分析插入核中,其疏水性的一端进入主体有机 溶剂中,酶分子溶剂溶于逆胶束中,组成逆胶束 酶系统。
8
¯ 对微生物无毒 (包括固定化过程中和固定化后) ;
¯ 载体表面应具有化学活性集团,这些基团可以直接或经
过较为温和的化学方法活化后与生物分子偶联;        ¯ 载体对生物分子而言是惰性的,或者是相对惰性的;
¯ 对细胞的通透性,允许基质底物和代谢产物渗透和扩散,
维持细胞的生命活力;
¯ 成本低,来源广泛。
9
五、 固定化酶和固定化微生物在环境工程中   的应用
(一)固定化酶和固定化微生物在废水生物处理中  的研究现状
固定化酶技术只限于水解酶类和少数胞内酶   研制成功和应用,处理废水成本高。而固定化微  生物技术应用研究的比较多。
(二)固定化微生物在废气生物处理中的应用前景
10
第二节 微生物细胞外多聚物的开发和应用
11
微生物的胞外多聚物,即ECP,是微生物在一 定的环境条件下,在其代谢过程中分泌的、包围在 微生物细胞壁外的多聚化合物。
包括荚膜、粘液层及其它表面物质。这些多聚 物经分析得知其成分为脂、脂肽、多糖脂、中性类 脂衍生物。
微生物细胞外多聚物可用作表面活性剂、絮凝 剂或助凝剂、沉淀剂。还可应用于破乳、润湿、发 泡和抗静电。在废水生物处理方面的应用已有报道。
12
分类
产物类型
生产菌
1 糖脂
海藻糖脂
节杆菌属、分枝菌属、诺卡氏 菌属、棒杆菌属、红球菌属
鼠李糖
假单胞菌属
槐糖脂
Torulopsis
2 中性脂/脂肪酸
甘油酸、脂肪酸、脂肪醇、蜡
不动杆菌属、梭菌属
3 含氨基酸类脂
脂蛋白、脂肽脂氨基酸
芽孢杆菌属、诺卡氏菌属、棒 杆菌属、链霉菌属、分枝杆菌 属、假单胞菌属、葡糖杆菌属
4 磷脂
磷脂酰乙醇胺
红球菌属、硫杆菌属
5 聚合物
脂杂多糖、脂多糖复合物、蛋 白质-多糖复合物
不动杆菌属、地霉属
6 细胞表面本身
生物破乳剂
诺卡氏菌属、红球菌属
肽脂
不动杆菌属
13
一、生物表面活性剂和生物乳化剂的开发与应用
表12-1   生物表面活性剂和生物乳化剂的分类
                
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