谷氧还蛋白S在大肠杆菌E.coli 中的表达纯化及特异性研究.docxVIP

摘 要 　　谷氧还原蛋白S是一类通过调节氧化还原反应维持蛋白质稳态的小分子蛋白，对生物的抗氧化反应和生长发育等方面发挥重要作用。为了解清楚S蛋白的抗氧化机制，需要建立简便快速且能大量获得S蛋白的有效方法。本实验在原核系统大肠杆菌中通过基因克隆，从基因文库中获得cDNA，并构建了含目的基因的原核表达载体，使用异丙基硫代半乳糖苷( IPTG)在大肠杆菌中诱导可溶性表达，并进一步利用亲和层析进行纯化，成功得到纯度较高的谷氧还蛋白S，建立了S蛋白的体外重组表达体系。同时，对获得的谷氧还蛋白S进行质谱分析，研究其特异性。本实验通过质粒重组、原核表达和蛋白纯化技术，建立一种快速便捷且能获得大量S蛋白的有