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核酸的研究方法详解演示文稿 本文档共26页；当前第1页；编辑于星期六\7点10分 （优选）核酸的研究方法 本文档共26页；当前第2页；编辑于星期六\7点10分 DNP可用水饱和的酚抽提，去除蛋白质。还可用氯仿异戊醇去除蛋白质。 水相中的DNA可被0.3M NaAC-70%乙醇沉淀。 （二）RNA的分离 RNase 的灭活： 玻璃器皿：140-200℃，8h 塑料器皿：0.1%DEPC，37，过夜 提取液加盐酸胍或异硫氰酸胍 反应体系中加RNasin等特异的RNase抑制剂 本文档共26页；当前第3页；编辑于星期六\7点10分 ★用0.14mol/L NaCl使DNP沉淀，上清中即为RNA核蛋白（RNP）。盐酸胍、苯酚等去蛋白。 ★异硫氰酸胍/苯酚/氯仿法 ★异硫氰酸胍/氯化铯密度梯度离心法 蛋白质：＜1.33g/ml DNA：1.71g/ml左右 RNA：＞1.89g/ml ★mRNA的制备： oligo(dT)纤维素（琼脂糖凝胶）亲合层析法 本文档共26页；当前第4页；编辑于星期六\7点10分 （三）核酸含量的测定方法 核酸纯度的鉴定可通过测定样品在260 nm和280nm的光吸收比值，进一步的鉴定可通过琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳。 ①磷的测定 RNA中含磷量为9.0％，DNA中含磷量为9.2％，因此每测得1g磷就相当于含有11g核酸。含磷量的测定是用浓硫酸