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- 2023-11-25 发布于上海
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猪传染性肝炎病毒的基因克隆及分子特征研究的中期报告
猪传染性肝炎病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种引起猪肠道疾病的病毒,在全球范围内广泛流行。为了更好地了解PEDV的分子机制和抗病性,我们进行了基因克隆及分子特征研究,以下是中期报告:
1. PEDV基因克隆
采用RT-PCR技术从鼻咽部标本中扩增出PEDV S、M和N基因序列,并进行了测序验证。序列比对结果显示,所克隆的PEDV序列与国内外已知的PEDV菌株序列同源性较高,具有较好的代表性。
2. PEDV基因结构分析
通过序列比对和分析,发现PEDV S基因编码的蛋白为刺突糖蛋白,具有多个保守结构域,其中包括S1和S2亚基。PEDV M基因编码的蛋白为膜蛋白,含有一个跨膜区域,可能参与病毒入侵和病毒包裹。PEDV N基因编码的蛋白则是核仁蛋白,含有一个较为保守的核心结构域,可能在病毒复制过程中发挥重要作用。
3. PEDV遗传演化分析
采用Maximum likelihood方法对PEDV S基因序列进行进化树构建,并进行了遗传分支选择分析。结果显示PEDV可以分为S1a、S1b、S2a、S2b、S2c五个分支,其中S1a为一类较早的PEDV分支,而S2b和S2c则是PEDV在中国最常见的两个分支。
4. PEDV质粒构建
利用PCR扩增技术将克隆得到的PEDV S、M和N基因
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