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一、mRNA的前体加工 1、 5?端形成 帽子结构(m7GpppNp —) 2、3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 3、中部剪接除去内含子 4、链内部核苷酸的甲基化 hnRNA转变成mRNA的加工过程包括: 本文档共90页;当前第62页;编辑于星期六\12点15分 ⑴ 修饰的化学反应: ⑵ 5′-端的修饰在核内完成,且先于中段剪切。 ⑶ 5′帽子分Cap0、Cap1、Cap2。 (一)5′-端加上帽子结构(mGpppNp—) 5′pppN… 磷酸酶 ppi 5′pN… pppG pi 5′GpppN… 甲基化酶 +CH3 m7GpppN… 本文档共90页;当前第63页;编辑于星期六\12点15分 3、CAAT 框: 位于 -75 附近,保守序列为 GGNCAATCT。 头两个 G 非常重要,一但突变,转录效率大大 下降。 CAAT 框控制着转录起始的频率。 4、GC 框: 位于-110附近,以5 ′CCGCC 3′序列为特征。 本文档共90页;当前第30页;编辑于星期六\12点15分 5、增强子(enhancer): 能结合反式作用因子,决定基因的时间和空间 特异性表达,增强启动子转录活性的DNA序列。 增强子作用特点: ⑴ 增强效应十分明显:使转录频率增加百倍或千倍。 ⑵ 增强效应与其所处的位置和取向无关: 增强子以5′→3′或 3′→5′排列对启动子都有作用。 ⑶ 大多为重复序列:长约50bp,适合与反式因子结合,内部常有一个核心序列,为增强效应所必需。 ⑷ 增强效应具有严密的组织和细胞特异性。 ⑸ 没有基因专一性。 ⑹ 许多增强子受外部信号的调控。 本文档共90页;当前第31页;编辑于星期六\12点15分 GCGC-CAAT-TATA-ATG AATAAA 切离加尾 真正终止点 修饰点 外显子 内含子 翻译起始 转录起始 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 真核生物RNApolⅡ的启动子 本文档共90页;当前第32页;编辑于星期六\12点15分 (三)RNA聚合酶 Ⅲ 的启动子 即 tRNA基因的启动子,称Ⅲ类启动子。 Ⅲ类启动子位于转录起始点下游,称 下游启动子或内部启动子。 Ⅲ类启动子包括:A盒、B盒 A盒靠近5′方向; B盒 靠近3 ′方向 。 Ⅲ类启动子需要的转录因子包括: TF Ⅲ C、TF Ⅲ B、TF Ⅲ A,前两者是共同 的,后者为5S rRNA基因转录所需。 本文档共90页;当前第33页;编辑于星期六\12点15分 本文档共90页;当前第34页;编辑于星期六\12点15分 三、原核生物和真核生物 转录起始位点的结构差异 原核生物 真核生物 帽子结构 没有 有 起始核苷酸 嘌呤或嘧啶 嘌呤(A为主) 启动区范围 较小(+1~-70) 较大 (+1~-110) 上游序列 TTGACA CAAT、GC、增强子 本文档共90页;当前第35页;编辑于星期六\12点15分 图5-4 P155页 原核生物与真核生物启动子比较 本文档共90页;当前第36页;编辑于星期六\12点15分 原核生物和真核生物转录及抑制剂 第 四 节 原核生物转录的起始 原核生物转录的延长 原核生物转录的终止与新合成RNA链的释放 真核生物的转录 RNA生物合成抑制剂 本文档共90页;当前第37页;编辑于星期六\12点15分 转录起始需解决两个问题: RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开,使其中的一条链作为转录的模板。 一、原核生物转录的起始 本文档共90页;当前第38页;编辑于星期六\12点15分 4. -10区DNA双链解开12~17bp,形成开放的二 元启动子复合物(模板-酶)。 2. RNA聚合酶全酶(?2???ω?)与模板-35序列结合, 形成闭合的二元闭合启动子复合物。 转录起始过程 1. ?因子辨认转录起始点(-35区的TTGACA序列) 3. RNA聚合酶向-10区转移,并与之牢固结合。 本文档共90页;当前第39页;编辑于星期六\12点15分 RNApol (?2
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