细菌病毒培养技术详解演示文稿.pptVIP

4 禽胚的接种后孵育 接种后，蜡泪封孔，置37℃下孵化 ，每天照蛋2次以上，通过禽胚的病变初步确定病毒的存在及增殖情况，淘汰24h内死胚。 操作要点 病毒感染指征： 死亡 充血、出血或出现坏死灶 畸形 出现痘斑 本文档共47页；当前第30页；编辑于星期日\22点42分 5 病毒的收获 操作要点 绒毛尿囊膜接种 尿囊膜接种 卵黄囊接种 羊膜腔接种 本文档共47页；当前第31页；编辑于星期日\22点42分 照 蛋 任务实例—病毒的尿囊腔接种培养技术 本文档共47页；当前第32页；编辑于星期日\22点42分 尿囊腔接种法 本文档共47页；当前第33页；编辑于星期日\22点42分 接种部位消毒 任务实例—病毒的尿囊腔接种培养技术 本文档共47页；当前第34页；编辑于星期日\22点42分 细菌病毒培养技术详解演示文稿 本文档共47页；当前第1页；编辑于星期日\22点42分 （优选）细菌病毒培养技术 本文档共47页；当前第2页；编辑于星期日\22点42分 本文档共47页；当前第3页；编辑于星期日\22点42分 （二）细菌生长繁殖的方式 二分裂法 繁殖方式： 链球菌 八叠球菌 葡萄球菌 本文档共47页；当前第4页；编辑于星期日\22点42分 （三）细菌生长繁殖的速度 本文档共47页；当前第5页；编辑于星期日\22点42分 （四）细菌生长繁殖的速度 分为四期：迟缓期 、 对数期、稳定期、衰退期 本文档共47页；当前第6页；编辑于星期日\22点42分 （五）常用培养基种类 厌氧培养基 基础培养基 增菌培养基 选择培养基 鉴别培养基 本文档共47页；当前第7页；编辑于星期日\22点42分 细菌培养技术 1 细菌的培养基本知识 2 细菌的规模化培养 3 细菌的计数技术 本文档共47页；当前第8页；编辑于星期日\22点42分 二、细菌的规模化培养 种子接种 是指菌体增殖培养物。 收获时间 最佳培养时间依据细菌的生长曲线而定。 对数生长期 本文档共47页；当前第9页；编辑于星期日\22点42分 培养方法 1．固体培养基表面培养法 用于制备抗原、灭活苗、冻干苗。 2．液体静置培养法 需氧菌（深度1/2）和兼性厌氧均可用，厌氧菌（深度3/4），还需加肝块。 3．深层通气培养法 是目前菌苗生产的主要培养法。安装有自动控温、消泡、调pH、自动控制通气量、自动磁力搅拌等装置。细菌接种1～2h，再通入滤过除菌空气，并适当搅拌分散通入的气体，以增加培养液中的溶氧量。及时补充营养 。 本文档共47页；当前第10页；编辑于星期日\22点42分 4．透析培养法 在细菌培养液与培养基之间隔有一层透析膜，使培养基中高浓度小分子量的营养成分通过透析膜（不能透过大分子的细菌或毒素）不断扩散到细菌培养液中，供细菌生长繁殖，获得高浓度的细菌或毒素。 透析器 1.螺栓 2.培养基贮存室 3.视镜 4.透析膜 5.培养室 本文档共47页；当前第11页；编辑于星期日\22点42分 5、连续培养 连续培养系统是一个恒定体积的流动系统，新鲜培养基以恒定的速度流入，又以相同的速率流出除去多余的液体，细菌始终保持在对数生长期。 本文档共47页；当前第12页；编辑于星期日\22点42分 细菌培养技术 1 细菌的培养基本知识 2 细菌的规模化培养 3 细菌的计数技术 本文档共47页；当前第13页；编辑于星期日\22点42分 三 细菌的计数技术 细菌性疫苗在制造中，往往需要计算每毫升所含细菌的总数。 1.显微镜直接计数法 2.活菌计数法 倾注平板培养法 将被测样品根据菌数含量多少，用普通肉汤或生理盐水作10倍递进稀释。分别取其1ml加在灭菌的平皿中，然后取预先加热融化且冷至45～50℃，立即摇匀放平，凝固后培养，统计平皿上长出的菌落数，乘以稀释倍数，即为每毫升样品中含有的活菌数。 本文档共47页；当前第14页；编辑于星期日\22点42分 平板表面散布法 接种量为0.1ml 琼脂板的制备 稀释菌液 接种 培养 计数 选择菌落数在30～300之间的平皿用以计数，每个稀释度应取其菌落平均数。 活菌数／ml=2个平板平均菌落数×10×稀释倍数。 举例：在10 稀释的平板中所得平均菌落数为78个。 计算结果：78×10×10 =7.8×10 个活菌／ml 微量点板计数法 接种量为0.02ml 10 -8 -8 本文档共47页；当前第15页；编辑于星期日\22点42分 3 比浊计数法 是对比细菌悬液与标准管