影响亲和层析主要因素（24页）.pptxVIP

实验;课前思考题;谷胱甘肱转硫報爾介;过氧化物和卤化;有很多生物大分子与相应的分子间具有专-的可逆 结合的特性，如酶与其底物、抑制剂、辅助因子，抗体 \ 与抗原，核酸与互补的碱基序列、核酸聚合酶、结合蛋 內，激素与其受体、载体蛋白，细胞与其表面特异蛋内 j 等等，它们依靠分子间的氢键、范德华力进行结合，这 i 种专一的可逆结合力的称为亲和力。亲和层析的方法就 是根据fl有亲和力的生物分子间可逆地结合和解离的原 理建立和发展起来的。;将对能可逆结合和解离生物分子的一方作为配基，;配途;柴和层析介质的剌备;载体的选择，亲和?析的载体一般是凝胶类层析介 质。一般比较理想的载体应具备稀松的多孔网状结构， 对于溶液具有良好的亲水性、流动性和涉透性，大孔径 凝胶介质可以有效地使凝胶内部的羟基得到活化，以保 证较高的活化效率，提高了配基的有效浓度，提供较高 的亲和容呈：必须有足够数虽的化学基团，经化学方法 活化后，可以与火量的配基相偶联；具有良好的机械性 能，保证亲和柱维持较好的流速：必须是不溶于水、化 学惰性的，非特异性吸附作用弱：有良好的物理和化学 的稳定性，在配基偶联、亲和层析、再生处埋过程中不 会因离子强度、温度、pH的变化，变性剂、去污剂的应 用而破坏载体的物理化学结构，在介质的反复使用过程 中能抗微生物和酶的侵蚀。;琼脂糖凝胶：Ed前应用最多的是瑞典Pharmacia公司生 产的S