实验一-紫外吸收法与Lowry法测定蛋白质含量-.pptxVIP

紫外吸收法测定蛋白质含量;一、实验目的;二、实验原理;三、实验试剂与器材;1．制作标准曲线;·2．样品测定;（2）血清球蛋白含量测定：

取新鲜血清100μL，边摇边缓慢滴入饱和(NH4)2SO4溶液100μL，混匀后室温放置10min，3000rpm离心10min，弃去含清蛋白的上清液，于沉淀中加入0.9%NaCl溶液0.5mL，振摇使其溶解，即为粗提球蛋白溶液。再加0.9%NaCl溶液7.5mL，混匀;五、实验结果;六、思考题;Folin-酚试剂法（Lowry法

）

测定蛋白质含量;一、实验目的;二、实验原理;·（2）加入酚试剂后，在碱性条件下，这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定，很容易还原酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸，使之生成磷钨蓝和磷钼蓝的混合物。这种溶液蓝色的深浅与蛋白质的含量成正相关，可用于蛋白质含量测定。;三、实验试剂与器材;取6支试管，编号，按下表加入试剂，混匀。各管分别加入5mL试剂甲，混匀，于室温放置10min。再加入0.5mL试剂乙，立即振摇均匀，于室温放置30min，然后于500nm比色测定。以吸光度为纵坐标，蛋白质浓度为横坐标绘制标准曲线。;·2.样品测定

取1.0mL样品溶液于试管中，加入5mL试剂甲混匀后再加入0.5mL试剂乙，振摇均匀后同标准曲线绘制操作，测出待测样品溶液500nm的吸光度值（A500）。;五、实验结果;六、思考题