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20-HETE经线粒体信号通路诱导心肌细胞凋亡的研究的开题报告

研究背景：

经线粒体通路是一条重要的细胞凋亡通路，包括线粒体膜通透性转化、胞质细胞因子Cyt-c释放、协同激活半胱氨酸家族酶Caspase的信号传递过程。在心肌缺血/再灌注损伤、心衰、肿瘤和炎症等情况下，经线粒体通路引起的心肌细胞凋亡可能是导致心血管疾病的重要机制之一。此外，20-HETE是一种内源性二十碳五烯酸代谢产物，它已被证明在心血管系统中影响多种生理和病理过程包括：血压调节、心肌重构、缺血再灌注损伤等。固然有一些文献证明20-HETE通过影响心肌线粒体功能运作参与心血管系统的脏器损伤，但还没有研究关注20-HETE对经线粒体通路的调控机制和心肌细胞凋亡的作用。

研究目的：

本研究旨在阐述20-HETE参与心肌细胞凋亡的作用机制和调控经线粒体通路的分子机制，揭示20-HETE-经线粒体信号通路及其调控作用在心血管疾病发生和发展中的作用机制。

研究方法：

1.培养原代小鼠心肌细胞，通过Westernblot和实时荧光定量PCR抑或蛋白质水平检测经线粒体通路相关蛋白的表达变化。

2.20-HETE水平检测：采用HPLC鉴定方法测定小鼠心肌细胞培养基中20-HETE水平的变化。

3.siRNA干扰体系：利用RNAi技术沉默20-HETE关键酶体系研究20-HETE对经线粒体通路和心肌细胞凋亡的作用。

4.离体心肌缺血再灌注模型：采用Langendorff体外灌流循环模型模拟心肌缺血再灌注过程，建立20-HETE参与经线粒体通路调控影响心肌细胞凋亡的伤害模型。

5.CellCountingKit-8试剂盒检测法测定细胞增殖活力值和细胞凋亡率。

研究意义：

1.揭示20-HETE参与经线粒体通路的调控机制，探索心肌细胞凋亡的病理生理基础，为心血管疾病预防和治疗提供新思路。

2.发掘经线粒体通路的分子调控机制，为开发心肌细胞凋亡的治疗药物提供逻辑和理论基础。

3.突破性的探索经线粒体通路在20-HETE调控心血管系统功能和疾病发生发展过程的作用，为心血管系统发病机制的研究提供新的视角。

4、研究成果可为心血管系统药物的开发提供新策略，提高医学科研的推进效率。