碱性磷酸酶km值的测定_2.pptxVIP

碱性磷酸酶Km值的测定;【实验目的】;【实验原理】;Vmax?[S];将米氏方程变形为双倒数方程，以l/v

－1／[s]作图，将各点连线，在横轴截距为-／km，据此可算出Km值。

1/V=Km/Vmax?[S] + 1/Vmax; 本实验以碱性磷酸酶为例，用磷酸苯二钠为其底物，生成酚和磷酸，酚在碱性溶液中与4一氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化生成红色醌的衍生物，根据红色的深浅可测出酶活力高低其反应式如下：

磷酸苯二钠+H2O AKP OH- 苯酚

苯酚+4-氨基安替比林 K3Fe(CN)6 醌衍生物

（红色）;;;碱性溶液 1.0;;2、作图;[S]; 比较两个值的大小,分析实验误差产生的原因

比较两种Km测定方法各自的优缺点