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- 2023-12-15 发布于湖南
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《基因工程的操作工具及操作的基本程序》知识解读及实例分析
一、基因工程概念基因工程是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作重组DNA技术。基因工程(重组DNA技术/转基因技术)的概念理解操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达原理基因重组结果创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
1、限制性内切核酸酶----“分子手术刀”(1)来源:主要来自原核生物(2)种类:数千种,限制酶不是一种酶,而是一类酶。GAATTCCTTAAG(3)特点:能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开,如下图。二、基因工程操作的基本工具
③结果:产生黏性末端或平末端,如右图。GAATTCCTTAAG①作用部位:特定切点上的磷酸二酯键②识别序列长度:大多数是6个核苷酸序列,如右图。
EcoRⅠ中轴线粘性末端平末端SamⅠ④沿中轴线切开,产生平末端;沿中轴线两侧切开,产生粘性末端,如下图。
⑤能被限制性酶特异性识别的切割位点一般都具有回文序列:即在切割位点,DNA一条链正向读的碱基序列与另一条反向读的碱基序列完全一致,如下图。⑥在切割含目的基因的DNA分子时,需要在目的基因的两端都用限制性
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